[发明专利]一种鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的分离方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的分离方法，特别涉及一种用大孔吸附树脂分离鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的方法，属于生物化工分离技术领域。

背景技术

熊去氧胆酸是一种无毒性的亲水胆酸，对多种疾病具有治疗作用。目前熊去氧胆酸被用于原发性硬化性胆管炎、胆固醇性胆结石、胆汁反流性胃炎和胆源性膜腺炎等疾病的治疗。另外，熊去氧胆酸也是胆汁淤积性肝病的首选药物，并且用于提高肝脏移植术后的成活率。

熊去氧胆酸是熊类特有的胆汁酸成分，结构式如通式⑴所示：

                  ⑴

目前熊去氧胆酸主要由两种方法获得。第一种是养殖熊，然后通过活体引流得到熊的胆汁，再从胆汁中提取熊去氧胆酸。这种方法的周期较长，效率不高，而且对熊的身体伤害明显。第二种是通过其他原料，如鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸。

鹅去氧胆酸是熊去氧胆酸的同分异构体，本身也可以用于胆固醇性胆结石的治疗。但是相比熊去氧胆酸，鹅去氧胆酸治疗胆结石容易产生腹泻、肝功能损害、血清胆固醇浓度增高等副作用。鹅去氧胆酸的结构式如通式⑵所示：

                       ⑵

由于鹅去氧胆酸可以从鸡胆、鸭胆和猪胆中获得，来源比较丰富，所以工业上通常较多应用从鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸。但通过鹅去氧胆酸合成熊去氧胆酸的反应转化率只能达到50%～75%，为了减少药物的副作用并且提高原料的利用率，必须将鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸混合物中的鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸分离。目前工业上采用有机溶剂选择性地从含有熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的混合物中溶解除去鹅去氧胆酸等杂质。但采用溶剂法具有单位溶剂的生产能力较低，溶剂用量大，溶剂毒性大，产品收率低等缺点。

发明内容

本发明的目的是为克服溶剂法的缺点，提高原料的利用率，符合经济、环保要求，提供一种用大孔吸附树脂分离鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的方法。

为达到上述目的，采用的技术方案是：一种鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的分离方法，其特征在于依次包括步骤：

⑴配制上柱液：取熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的混合物，溶解于碱水溶液中，调节pH为7-8,然后加入去离子水稀释至固含量为10%-20%；

⑵上柱吸附：将步骤⑴所得上柱液泵入装填非极性多孔合成吸附剂的树脂柱中；

⑶解吸：以体积百分数为20%-30%的水溶性有机溶剂配置第一洗脱剂，以纯水溶性有机溶剂配置第二洗脱剂，分别将三倍柱体积第一洗脱剂和二倍柱体积第二洗脱剂泵入吸附树脂柱中解吸，流速为1倍柱体积/小时；

⑷后处理：将步骤⑶所得的解吸液真空浓缩，回收溶剂；浓缩物加入无机酸液调pH值到2-3，析出沉淀，过滤，洗涤至中性，干燥，结晶，真空干燥可得成品。

步骤⑴所述碱水溶液为氢氧化钠、氢氧化钾，或氨水。

步骤⑵所述非极性多孔合成吸附剂为大孔吸附树脂HZ816,HZ818，HZ830。

步骤⑶所述水溶性有机溶剂为甲醇，乙醇，正丙醇，异丙醇，叔丁醇，二恶烷，四氢呋喃，丙酮，二甲基甲酰胺，二甲亚砜等。

步骤⑷所述无机酸液是盐酸,硫酸,或硝酸。

本发明的有益效果是，大孔吸附树脂分离纯化性能好，可连续地或间歇地从熊去氧胆酸盐和鹅去氧胆酸盐的混合物中，高精度，高收率地分离熊去氧胆酸盐和鹅去氧胆酸盐，工艺简单，生产成本低，工业生产效率高。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步的说明，说明本发明涉及的技术方案，揭示本发明的最佳实施方式，使本领域的普通技术人员能够应用实施本发明。但应当理解，本发明并不限于下述实施例，基于本发明的启示，任何显而易见的变换或等效替代，也应当被认为是落入本发明的保护范围。

实施例中，配制上柱液时，取熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸的混合物，按当量比1∶2.5比例，溶解于过量碱水溶液中，然后调节pH为7-8,加入去离子水稀释至固含量为10%-20%；上柱流速控制在1.5－2倍柱体积/小时。

玻璃色谱柱内径28mm，长400mm，充填200ml非极性大孔吸附树脂HZ816, 或HZ818、或HZ830，比表面积不小于400m²/g,细孔体积不小于1ml/g，市售上海华震科技有限公司产品。