[发明专利]一种辅酶A的制备工艺有效
申请号: | 201110225924.8 | 申请日: | 2011-08-08 |
公开(公告)号: | CN102321708A | 公开(公告)日: | 2012-01-18 |
发明(设计)人: | 刘盛儒;隗青;孙岩;王增鑫;王基伟;张梅村;迟创成 | 申请(专利权)人: | 济南维尔康生化制药有限公司 |
主分类号: | C12P19/40 | 分类号: | C12P19/40;C12R1/13 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 杨琪 |
地址: | 250100 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 辅酶 制备 工艺 | ||
1.一种辅酶A的制备工艺,包括微生物发酵、酶促合成、大孔树脂吸附、氧化亚铜提纯、葡聚糖凝胶层析和还原沉淀六部分,其中,微生物发酵包括菌种选育、菌种发酵两个阶段,其特征在于:所述菌种发酵阶段,所采用的培养基的配方组成如下:葡萄糖:8%~10%;玉米浆:1.3%~1.5%;牛骨或鱼蛋白胨:1.5%~1.8%;硫酸镁:1.0%~1.2%;氯化钙:0.01%~0.02%,尿素0.8%~1.0%,余量为水,各组分按重量百分比。
2.根据权利要求1所述的一种辅酶A的制备工艺,其特征在于,所述养基的配方组成如下:葡萄糖:10%;玉米浆:1.4%;牛骨蛋白胨:1.5%;硫酸镁:1.0%;氯化钙:0.01%,尿素0.8%,余量为水。
3.根据权利要求1所述的一种辅酶A的制备工艺,其特征在于:所述菌种发酵阶段,发酵条件为:温度30~35℃,空气流量1∶(0.6~1.0),时间20~26小时,发酵完成后,检测pH值、OD值、残留糖量并镜检有无杂菌。
4.根据权利要求1所述的一种辅酶A的制备工艺,其特征在于:所述菌种选育阶段,选用产氨短杆菌。
5.根据权利要求1所述的一种辅酶A的制备工艺,其特征在于:在所述酶促合成部分,向酶反应液中分次加入1次、2次或3次前体物质盐酸半胱氨酸、泛酸钙和三磷酸腺苷二钠。
6.根据权利要求1所述的一种辅酶A的制备工艺,其特征在于:在所述酶促合成部分,向酶反应液中分1次加入前体物质盐酸半胱氨酸、泛酸钙和三磷酸腺苷二钠。
7.根据权利要求5或6所述的一种辅酶A的制备工艺,其特征在于:所述前体物质盐酸半胱氨酸、泛酸钙和三磷酸腺苷二钠的添加量分别为0.1%~0.2%盐酸半胱氨酸、0.07%~0.08%泛酸钙、0.2%~0.3%三磷酸腺苷二钠,按重量百分比。
8.根据权利要求1所述的一种辅酶A的制备工艺,其特征在于:所述酶促合成部分,酶反应温度30~35℃,空气流量1∶(0.3~0.6),时间20~24小时,反应过程中不断地搅拌;反应后,得反应液,反应液酸化压滤,得压滤清液。
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