[发明专利]鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因及其应用无效
| 申请号： | 201110221829.0 | 申请日： | 2011-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN102559711A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 陈雯莉;汪方奎;支遥;王莉;张巨源 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N9/04;C12N15/10;A01H5/00 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 王和平 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鱼腥蓝 细菌 酮基 脱氢酶 基因 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.权利要求1所述的鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因所编码的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
3.根据权利要求1所述的鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因的克隆方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)分离鱼腥蓝细菌总DNA；
(2)根据鱼腥蓝细菌的基因组序列，设计上下游引物：上游引物为GCCCATATGTTGGCAAAAAATGAG；下游引物为GCCCTCGAGGGAAATAGGTTATAAGTC，在上下游引物中分别引入Nde I和XhoI核酸内切酶酶切位点；
(3)以鱼腥蓝细菌总DNA为模板，利用上下游引物进行PCR扩增，得到PCR产物；
(4)回收PCR产物；
(5)将PCR产物利用Nde I和XhoI核酸内切酶连入克隆载体pBSpetE中，构建重组质粒；
(6)用重组质粒转化大肠杆菌，进行培养、活化。
4.根据权利要求1所述的鱼腥蓝细菌2-酮基-肌醇脱氢酶基因在抗百草枯除草剂转基因植物中的应用。
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