[发明专利]CSFV、PCV2与PRV多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法有效

专利信息
申请号: 201110221771.X 申请日: 2011-08-04
公开(公告)号: CN102382902A 公开(公告)日: 2012-03-21
发明(设计)人: 魏战勇;胡慧;刘芳;崔保安;宋亚鹏;韩志涛 申请(专利权)人: 河南农业大学
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93
代理公司: 郑州中原专利事务所有限公司 41109 代理人: 张绍琳
地址: 450002*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: csfv pcv2 prv 多重 sybr green 实时 荧光 pcr 引物 及其 检测 方法
【权利要求书】:

1.CSFV、PCV2与PRV多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物,其特征在于:

CSFV引物的序列如下:

上游引物P1:5′-AAACGGAGGGACTAGCCGT-3′;

下游引物P2:5′-TGCCATGTACAGCAGAGA-3′;

PRV引物的序列如下:

上游引物P3:5′-CTCGCCATCGTCAGCAA-3′;

下游引物P4:5′-GCTGCTCCTCCATGTCCTT-3′;

PCV2引物的序列如下:

上游引物P5:5′-GGGCCAGAATTCAACCTTACCC-3′;

下游引物P6:5′-CGCACCTTCGGATATACTGTCA-3′。

2.利用权利要求1所述引物检测CSFV、PCV2与PRV的多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测方法,包括提取病毒的DNA后,按如下SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR反应体系和反应条件对病毒进行检测,其特征在于:

所述SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR反应体系,在25μl体系中加入以下成份:

所述反应条件为:95℃预变性1min;进入循环,95℃变性10s,58℃退火15s,72℃延伸15s,40个循环,循环结束后升温至95℃15s,再降至65℃15s,开始从65℃递增至94℃,采集荧光信号得出扩增产物的溶解曲线,于95℃15s结束反应。

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