[发明专利]一种戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒及其制备方法无效
| 申请号： | 201110217286.5 | 申请日： | 2011-07-29 |
| 公开（公告）号： | CN102288759A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 李习荣 | 申请（专利权）人： | 北京中检安泰诊断科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/576 | 分类号： | G01N33/576;G01N33/531;G01N33/532 |
| 代理公司： | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人： | 夏晏平 |
| 地址： | 100082 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 肝炎 病毒 igg 抗体 胶体 检测 试剂盒 及其 制备 方法 | ||
1.一种戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒，包括硝酸纤维素膜检测线包被的重组抗原HEV-Ag、质控线上包被的羊抗鼠IgG抗体和金标垫上包被的由胶体金标记的鼠抗人IgG单抗，其特征在于：
所述重组戊型肝炎病毒抗原浓度大于2mg/ml，用SDS-PAGE测定；
所述羊抗鼠IgG抗体浓度大于4mg/ml；
所述鼠抗人IgG单抗浓度大于2mg/ml，用SDS-PAGE测定，上样量在10μl条件下为两条带。
2.根据权利要求1所述的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）反应膜的制备：用磷酸盐缓冲液将重组HEV-Ag稀释到包被浓度为1.0mg/ml，将羊抗鼠IgG抗体稀释成包被浓度为2.0mg/ml，将两种包被液分别划到硝酸纤维素膜上，将已包被的硝酸纤维素膜干燥后保存；
（2）鼠抗人IgG单抗金结合物垫的制备：将标记浓度为10-23μg/ml的鼠抗人IgG单抗与胶体金进行偶联制得胶体金标记鼠抗人IgG单抗溶液，以转速为12000r/min离心40min，弃上清，加入胶体金结合物稀释液至原体积的1/2，然后用混合液浸泡金标垫，制备成HEV-IgG金结合物垫，将HEV-IgG金结合物垫干燥保存；
（3）切割装配：在反应膜所在胶板的上部揭去1.5cm宽的不干胶纸，粘贴上粗纤维滤纸，使纸的下部压住反应膜，揭去反应膜下部的0.9cm的不干胶纸，贴上HEV-IgG金结合物垫，并且金结合物垫的上部压住反应膜1mm，再揭去金结合物垫下部的的不干胶纸，贴上样品垫，样品垫的上部压住金结合物垫的下部1mm，制成反应板，再用切条机切成4mm试纸条，进行装卡后，装入铝箔袋内制成产品。
3.根据权利要求2所述的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）和（2）的干燥条件为37℃干燥3小时。
4.根据权利要求2所述的戊型肝炎病毒IgG抗体胶体金法检测试剂盒的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）的鼠抗人IgG单抗的标记浓度为10μg/ml。
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