[发明专利]一种鲤鱼肌肉中环丙沙星、恩诺沙星残留冻干粉标准样品的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于兽药残留检测的动物性食品基体标准物质技术领域，具体是涉及一种鲤鱼肌肉中环丙沙星、恩诺沙星残留基体冻干粉标准样品的制备方法。

标准物质是具有准确量值的测量标准，是研究与评价测量方法、保证测量结果的一致性和可比性，保证国家之间、部门之间、商品交换或技术交流之间、生产过程控制的不同时间之间的分析结果的可比性和一致性的重要物质。

标准物质(ReferenceMaterial，简称RM)包括纯的化学物质和具有一定理化特性的实物标准样品

背景技术

环丙沙星和恩诺沙星是典型的喹诺酮类药物，喹诺酮类药物是一种人工合成的广谱抗生素，很多国家都禁止使用喹诺酮类药物用作兽药，在我国环丙沙星是禁止用于动物的，恩诺沙星是限制使用的兽药，但一些养殖企业盲目追求治疗效果，大量滥用喹诺酮类药物，致使一些动物产品中存在一定喹诺酮类药物残留，日本、美国等发达国家经常以此为技术壁垒限制中国动物源食品特别是水产品的出口。

在食品安全检测体系中，标准物质对整个检测质量控制体系起到核心作用。欧盟对兽药残留分析方法与结果表达的法规(2002/657/EC)中明确指出了需要采用实物标准样品进行检测过程控制，可见实物标准样品在兽药残留检测中的具有十分重要的意义。目前用于喹诺酮类药物残留检测的标准物质主要是各种纯品标准样品，检测质量控制主要是通过向样品中添加纯的各种标准品后进行检测分析，这种分析方法无法代表目标分析物在活体内真正存在的状态，即无法代表目标分析物在动物的体内“内化”状态。这样方式得到的标准样品并非真正意义上的实物标准样品，由于目标物和基体结合情形与真实检测样品不完全一致而导致提取、净化等处理结果与日常分析样本存在较大差异，从而影响结果的可靠性和有效性。

发明内容

本发明是国内首次获得鲤鱼肌肉实物环丙沙星、恩诺沙星标准样品，且两种药物同时存在。

本发明的目的是提供一种鲤鱼肌肉中环丙沙星和恩诺沙星残留冻干粉标准样品的制备方法，通过添加环丙沙星和恩诺沙星养殖鲤鱼，获得样品材料，并制备成一种均匀性好、稳定性好、易保存且目标物和基体结合情形与真实检测样品一致的标准样品；该标准样品可用于环丙沙星、恩诺沙星等喹诺酮类药物残留检测质量控制、检测方法评价、检测能力评价。

本发明鲤鱼肌肉中环丙沙星和恩诺沙星残留冻干粉标准样品的制备方法：采用环丙沙星和恩诺沙星对活鲤鱼进行添加养殖，使鲤鱼体内含有环丙沙星和恩诺沙星，在不含药物水中饲养待鲤鱼肌肉药物分布达到均匀状态后，将鲤鱼捕捞快速冷冻至-18℃以下，将冷冻的鲤鱼室温下解冻，取肌肉部分匀浆制成鱼糜，冷冻干燥，过筛，装瓶，真空封装，制备得到鲤鱼肌肉中环丙沙星和恩诺沙星残留冻干粉标准样品；制备的标准样品中的环丙沙星和恩诺沙星浓度约为100ug/kg。

本发明的显著优点是：采用模拟养殖条件下对生长的活鲤鱼药物养殖添加后选择适当时机，将鲤鱼捕捞快速冷冻至-18℃以下，将冷冻的鲤鱼室温下解冻，取肌肉部分匀浆制成鱼糜，冷冻干燥，过筛，分装密封包装、均匀性检验、稳定性研究和协作实验检测，通过给药控制和采集时机的选择可获得预期含量的目标物结合状态与实际检测样品一致的含环丙沙星和恩诺沙星鲤鱼基体阳性材料，采用搅碎和匀化介质相结合的工艺可以保证材料的均匀性，冷冻干燥、分装密封可以保证样品的稳定性，便于标准样品的常温传递。本发明的产品可以在常温下运输，保质期长，目标物和基体结合情形与真实检测样品一致，可用于相关检测分析的质量控制，样品均匀稳定，运输方便，使用可靠，产品具有显著的经济价值和市场竞争力。

具体实施方式

下面结合具体实施例1对本发明作进一步详细的说明。

实施例1，一种鲤鱼肌肉中环丙沙星和恩诺沙星残留冻干粉标准样品的制备方法，本实施例以控制目标含量水平100ug/kg为例，其具体步骤如下：

(1)实验动物的选择：市购活体鲤鱼，要求个体大小均一、均重约1.5kg，应先确认样品中不含环丙沙星和恩诺沙星，随机取样，检测确认为阴性样品后进行喂养。阴性样品在20℃-25℃环境下饲养2天后，剔除受伤不健康的鲤鱼；