[发明专利]Roundup Ready转基因大豆检测用引物组及其检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 201110208466.7 申请日: 2011-07-25
公开(公告)号: CN102337331A 公开(公告)日: 2012-02-01
发明(设计)人: 曹以诚;杜正平;陈洵;李志勇;高东微;茅丽娜 申请(专利权)人: 广州华峰生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 陈卫
地址: 510663 广东省广州市经济技*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: roundup ready 转基因 大豆 检测 引物 及其 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种Roundup Ready转基因大豆检测用的EPSPS-NOS基因引物组,其特征在于,由外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP组成,其中:

外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;

外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;

内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;

内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;

或者,

外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示;

外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示;

内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示;

内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示;

或者,

外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示;

外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;

内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示;

内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;

或者,

外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示;

外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示;

内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示;

内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:14所示;

或者,

外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:15所示;

外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:16所示;

内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:17所示;

内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:18所示。

2.一种Roundup Ready转基因大豆检测用的内源性基因lectin引物组,其特征在于,由外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP组成,其中:

外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:19所示;

外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:20所示;

内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:21所示;

内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:22所示;

或者,

外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO:23所示;

外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO:24所示;

内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:25所示;

内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO:26所示。

3.一种Roundup Ready转基因大豆快速检测试剂盒,其特征在于该试剂盒由权利要求1所述EPSPS-NOS基因引物组、权利要求2所述内源性基因lectin引物组、Bst DNA 聚合酶、反应液、稳定液、显色液和阳性对照液组成,以上七种液体分别置于容器中,其中,所述反应液的配方为:每1L反应液中含有1.6~2mmol dNTP、20~25mmol Tris-HCl、10~12.5mmol氯化钾、10~12.5mmol硫酸铵、8~10mmol硫酸镁、1~1.25ml TritonX-100、0.8~1mol甜菜碱、内引物FIP/BIP各1.6~2mol和外引物 F3/B3各0.2~0.25mol;所述阳性对照为EPSPS-NOS基因DNA片段。

4.根据权利要求3所述的快速检测试剂盒,其特征在于所述的显色液为SYBR Green I或EvaGreen。

5.根据权利要求3所述的快速检测试剂盒,其特征在于所述每1L反应液中含有2mmol dNTP、25mmol Tris-HCl、12.5mmol氯化钾、12.5mmol硫酸铵、10mmol硫酸镁、1.25ml TritonX-100、1mol甜菜碱、内引物FIP/BIP各2mol和外引物 F3/B3各0.25mol。

6.根据权利要求3所述的快速检测试剂盒,其特征在于所述稳定液为石蜡油。

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