[发明专利]一种检测CCR5-Δ32基因突变的方法及引物

权利要求书

1.一组检测CCR5基因突变的引物，其特征在于，包括针对CCR5-Δ32的基因突变设计的三条特异性PCR引物，三条引物的核苷酸序列为SEQ ID No.1、2、3。

2.一种检测CCR5基因突变的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)从样品中提取基因组DNA；

步骤2)按权利要求1合成针对CCR5-Δ32的基因突变设计的三条特异性PCR引物；

步骤3)用三条特异性PCR引物，以基因组DNA为模板，进行多重PCR扩增；

步骤4)用琼脂糖凝胶电泳分离步骤3)中的扩增产物，观测产物条带数目，判断样本的CCR5的基因型：

(1)观测到2条带，样本为CCR5野生型；

(2)观测到1条带，样本为CCR5-Δ32纯和突变基因型；

(3)观测到3条带，样本为CCR5-Δ32杂合突变基因型。

3.按权利要求2所述一种检测CCR5基因突变的方法，其特征在于，纯合突变型、纯合野生型和杂合突变型经三条特异性引物PCR扩增，电泳分离扩增产物，分别形成1条带，2条带，3条带。

4.按权利要求2所述一种检测CCR5基因突变的方法，其特征在于，基因型与条带数量关系是指不同基因型的确认由PCR扩增产物的条带数量的多少来决定，而不必须依赖PCR扩增产物的长短或碱基对的个数。

5.按权利要求2所述一种检测CCR5基因突变的方法，其特征在于，步骤3)中，每25μL多重PCR反应体系包括：12.5μL的2X Tag mix，三条特异性PCR引物SEQ ID No.1、2、3分别为10μM，20μM，10μM，模板40ng，其余为水。