[发明专利]检测空肠弯曲菌的引物、探针及方法和试剂盒有效
申请号: | 201110196710.2 | 申请日: | 2011-07-13 |
公开(公告)号: | CN102268478A | 公开(公告)日: | 2011-12-07 |
发明(设计)人: | 张茂俊;张建中;乔博;何利华;顾一心 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;G01N21/64 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 张庆敏 |
地址: | 1022*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 空肠 弯曲 引物 探针 方法 试剂盒 | ||
1.一种用于检测空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni)的特异性引物,其扩增产物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如权利要求1所述的引物,其核苷酸序列为:
上游引物:CGGATAGTTATAGTATTGAAGTTATTGG,
下游引物:GAAGCAGCATAAATAGGATCTTTTG。
3.与权利要求1或2所述引物配合使用的荧光探针。
4.如权利要求3所述的荧光探针,其核苷酸序列为:
FAM-TTCTGGAGCACTTCCATGACCACC-BHQ1。
5.一种空肠弯曲菌的检测方法,其特征在于,以样品总DNA为模板,利用权利要求1或2所述的引物和权利要求3或4所述探针进行实时荧光定量PCR,根据扩增曲线判定结果。
6.如权利要求5所述的空肠弯曲菌的检测方法,其特征在于,实时荧光定量PCR的反应体系为:
7.如权利要求5或6所述的方法,其特征在于,所述实时荧光定量PCR的反应程序为:95℃预变性4min,1个循环;95℃变性10s,59℃退火30s,40个循环。
8.含有权利要求1或2所述引物和/或权利要求3或4所述探针的试剂盒。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其还包括:DNA裂解液、荧光定量反应液、阴性模板和/或阳性模板,所述阴性模板为双蒸水,所述阳性模板为空肠弯曲菌基因组DNA。
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