[发明专利]快速检测肌钙蛋白I的胶体金试纸及其制备方法

权利要求书

1.一种快速检测心肌肌钙蛋白I胶体金试纸条，其包括包被膜、喷涂有胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的胶体金垫1、喷涂有胶体金标记的抗BSA单克隆抗体或抗PEG单克隆抗体的胶体金垫2、样品垫、吸水垫和底板，所述的包被膜涂覆有抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体检测线和兔抗鼠抗体质控线。

2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述的胶体金垫1喷涂有粒径为10nm～100nm的胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体。

3.根据权利要求2所述的试纸条，其特征在于，所述的胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体用BSA或PEG封闭。

4.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述的胶体金垫2喷涂有粒径为20nm～100nm的胶体金标记的抗BSA单克隆抗体或抗PEG单克隆抗体。

5.根据权利要求1～4任一项所述的试纸条，其特征在于，所述的包被膜为硝酸纤维素膜。

6.根据权利要求1～4任一项所述的试纸条，其特征在于，所述的胶体金垫1、胶体金垫2和样品垫为聚酯膜或玻璃纤维素膜。

7.权利要求1～6任一项所述的试纸条的制备方法，包括如下步骤：

1)制备胶体金垫1：将BSA或PEG封闭的胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I抗体溶液喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，烘干备用；

2)制备胶体金垫2：将胶体金标记的抗BSA单克隆抗体溶液或抗PEG溶液喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，烘干备用；

3)制备包被膜：将抗心肌肌钙蛋白I抗体稀释液和兔抗鼠抗体稀释液喷涂于硝酸纤维素膜上，烘干备用；

4)将样品垫用样品垫溶液处理后烘干备用；

5)底板上依次相互交错地粘上制备的样品垫、金标垫1、金标垫2、包被膜、和吸水垫，然后在上面覆盖透明塑料密封膜得到试纸。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，胶体金标垫1的制备方法为：用碳酸钾调节颗粒粒径10nm～100nm胶体金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体，室温搅拌10～60min后，加入终浓度0.01％～1％的PEG20000溶液或者0.1％～5％的BSA溶液终止，冷冻离心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸盐缓冲液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液清洗后再次离心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA，0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液复溶后，使用Biodot三维喷点平台将复溶液以1～5μL/cm的速度喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，于25～40℃烘干8～24小时。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，胶体金垫2的制备方法是：用碳酸钾调节颗粒粒径10nm～100nm胶体金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗BSA单克隆抗体或者1～50μg抗PEG单克隆抗体，室温搅拌10～60min后，加入终浓度0.01％～1％的PEG20000溶液或者0.1％～5％的BSA溶液终止，冷冻离心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸盐缓冲液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液清洗后再次离心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA，0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸盐缓冲液复溶后，使用Biodot三维喷点平台将复溶液以1～5μL/cm的速度喷洒于聚酯膜或玻璃纤维素膜上，于25～40℃烘干8～24小时。

10.权利要求1～6任一项所述的试纸条在检测肌钙蛋白I中的应用。