[发明专利]快速检测肌钙蛋白I的胶体金试纸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及临床免疫学检测领域，具体涉及一种快速检测肌钙蛋白I胶体金试纸条及其制备方法。

背景技术

心肌梗死是全球范围内致死和致残的主要疾病之一。全球每年有1700万人死于心血管疾病，其中一半以上死于急性心肌梗死(AMI)。在中国，冠心病患者超过2千万人，而每年有超过100万人被急性心肌梗死夺去生命。因此，快速识别出早期急性心肌梗死患者并及时治疗是提高其存活率的关键。对于无典型胸痛和心电图改变的AMI患者，检测血清心肌标志物是诊断AMI的必要依据。以往世界卫生组织(WHO)定义的心梗标准包括缺血症状、心电图(ECG)异常改变和血清心肌酶学变化。然而随着敏感性和特异性更高的生化标志物——肌钙蛋白(cTn)的发现以及更精确的无创影像学技术的发展，使得检测到更小的心梗病灶成为可能。诊断心肌梗死的重要一条就是如何快速准确检测体内心脏生化标志物的水平。选择特异性的心肌梗死生化标志物和选择特异性高灵敏度的方法检测心肌梗死生化标志物水平(免疫诊断试剂盒)是快速诊断急性心肌梗死首先需要解决的问题。因此，各种以心肌梗死心脏标志物为检测对象的免疫诊断试剂盒和生物芯片逐渐应用于临床并得到广泛发展。

心肌肌钙蛋白(cTn)灵敏度高、特异性强、发病后持续时间长，几乎完全具有心肌组织特异性并具有高度敏感性，因此是评价心肌坏死的首选标志物。即使心肌组织发生微小区域的坏死也能检查到cTn的升高。cTn的升高对于诊断急性心肌梗死至关重要。目前cTn主要用于心肌缺血损伤的临床诊断、危险性估计和预后判断，此外还可用于MI后临床溶栓治疗效果判定；心肌缺血损伤面积的估计、临床诊断心肌炎、心肌创伤(心脏手术)、围手术期心脏并发症、严重脓毒血症或脓毒血症导致的左心衰竭、充血性心功能不全，以及某些治疗药物的临床疗效观察等。因此，如何快速、特异性、高灵敏度的检测体内肌钙蛋白的水平对于心肌梗死患者的诊断和治疗具有重要的意义，具有广泛的临床应用前景和市场潜力。

目前肌钙蛋白检测主要采用金标免疫法、酶联免疫法、化学发光法、酶联荧光分析法(ELFA)等方法。金标免疫法由于标本用量少，简便快速，适合于急性心肌梗死(AMI)的床旁检测，不受时间、地点限制，24h全方位为患者服务，在临床广泛应用，但是胶体金试纸条检测灵敏度低，一般情况最低检出限为1ng/mL。大量临床试验和循证医学证据表明，心肌肌钙蛋白作为心肌梗死的标志物具有非常高的灵敏度和特异性，在正常人体中用现有的检测方法几乎检测不出肌钙蛋白的含量，至少其在正常人体的含量低于0.1ng。临床广泛应用的金标免疫法作为心肌梗死检测的重要手段，其灵敏度的局限性制约了进一步的更广泛应用。因此，提高胶体金检测灵敏度作为快速诊断的一个重要方向受到越来越多的重视。如将生物素-亲和素放大系统、胶体金与荧光结合等技术应用于胶体金试纸的检测，以实现更精确的检测。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种快速检测肌钙蛋白I胶体金试纸条及其制备方法。

本发明提供的快速检测肌钙蛋白I胶体金试纸条，其包括包被膜、喷涂有胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的胶体金垫1、喷涂有胶体金标记的抗BSA单克隆抗体或抗PEG单克隆抗体的胶体金垫2、样品垫、吸水垫和底板，所述的包被膜涂覆有抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体检测线和兔抗鼠抗体质控线。

其中，所述的胶体金垫1喷涂有10nm～100nm的胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体。所述的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的量为1～50μg。

其中，所述的胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体为胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I的单克隆抗体或多克隆抗体。更进一步，所述的胶体金标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体用BSA或PEG封闭。

其中，所述的胶体金垫2喷涂有20nm～100nm胶体金标记的抗BSA单克隆抗体或抗PEG单克隆抗体。所述的抗BSA单克隆抗体或抗PEG单克隆抗体的量为1～50μg。

其中，所述的包被膜为硝酸纤维素膜；所述的胶体金垫1、胶体金垫2和样品垫为聚酯膜或玻璃纤维素膜。