[发明专利]一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法

权利要求书

1.一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于包括如下步骤：

1）选取甜高粱剑叶期2~3 cm的幼穗,切成小段；

2）接种于诱导培养基上培养，形成愈伤组织，诱导培养基为：MS基本培养基+2,4-D 3 mg/L+KT（激动素）0.5 mg/L+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；

3）将诱导出的愈伤组织转移到继代培养基中培养，继代培养基为：MS基本培养基+2,4-D 1.5 mg/L+KT（激动素）0.25 mg/L+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；

4）继代培养30天后，将愈伤组织转接到分化培养基中培养至出苗，分化培养基为：MS基本培养基+IAA (吲哚乙酸) 1 mg/L+ KT（激动素）0.5 mg/L+ 抗坏血酸10 mg/L+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；

5）将再生苗转移至生根培养基中进行根的诱导，生根培养基为：1/2MS培养基+ 30g/L蔗糖+8.0g/L琼脂pH5.8；

6）移栽到温室或大田。

2.如权利要求1所述的一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述长度为2~3 cm幼穗，在-4℃冰箱中放置2天，切成2-3mm长。

3.如权利要求1所述的一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述诱导培养基中培养条件为：于25±2℃暗培养30天。

4.如权利要求1所述的一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述继代培养为7天继代一次。

5.如权利要求1所述的一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述分化培养基中培养条件为：于25±2℃下16 h/d光照培养。

6.如权利要求1所述的一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述再生苗长至约5cm 高时，移至生根培养基中。

7.如权利要求1所述的一种以幼穗为外植体的甜高粱高频再生体系建立的方法，其特征在于：所述甜高粱品种为FETERITA NIDIANA、MN-2949、MN-2904、MN-3013和SILVER TOP-1。