[发明专利]一种鲽鱼鱼骨多糖的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鱼骨多糖的制备方法，具体涉及一种鲽鱼鱼骨多糖的制备方法。

背景技术

鲽鱼又叫比目鱼，栖息在浅海的沙质海底，捕食小鱼虾，主要生活在温带水域，是温带海域重要的经济鱼类。由于它们的身体扁平，双眼同在身体朝上的一侧，这一侧的颜色与周围环境配合得很好，它们身体的朝下一侧为白色。比目鱼的身体表面有极细密的鳞片，只有一条背鳍，从头部几乎延伸到尾鳍。

目前已有很多利用鲨鱼、魟鱼等鱼骨制备多糖的文献报道，经研究，鲽鱼鱼骨中含有的多糖对人体具有很好的保健效果，但目前没有关于从鲽鱼鱼骨中提取多糖这方面的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种鲽鱼鱼骨多糖的制备方法，本方法酶解时间短、生产成本低、所得的鱼骨多糖收率高、纯度高。

在目前报道的从鱼骨中提取多糖的方法中，对多糖的提取、纯化采用的方法主要是酶解法，步骤包括：碱解、酶解、纯化。这种方法一般存在酶解速度较慢、反应时间长、纯化时采用多次溶解再沉淀酒精用量大、产品收率低、颜色深的缺点。且不同的鱼骨酶解所用的酶也有不同，采用现今公开的酶对鲽鱼鱼骨进行提取多糖效果并不理想。本发明在大量实验的支持下，对适合于鲽鱼鱼骨的酶进行了选择和筛选，最终找到和合适的水解酶并确定了最终的提取工艺，具体技术方案如下：

一种鲽鱼鱼骨多糖的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）  鱼骨预处理：将新鲜鲽鱼鱼骨去肉、水煮，去掉鱼骨中的油脂，然后将鱼骨清洗、粉碎；

（2）  碱处理：将步骤（1）中粉碎后的鱼骨加入到水和碱中，使鱼骨溶解得到鱼骨液；

（3）  酶解：鱼骨溶解后，在上述鱼骨液中加入复合水解酶进行酶解，所用复合水解酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和脂肪酶的混合物，其用量比为5:（1-10）:（1-10）；酶解条件为：复合水解酶用量为20~10000U/g鱼骨， pH为4~10，反应温度为30~60℃，反应时间30~600min；

（4）  过滤：将鱼骨液过滤，取滤液；

（5）  除杂：在滤液中加入活性炭，对滤液进行除杂；

（6）  过滤除去活性炭，将滤液用酒精沉淀制得多糖。

进一步的，上述步骤（6）中酒精沉淀的过程为：向滤液中加入体积分数为95%的酒精至滤液中酒精的体积含量为50-70%，静置至多糖充分沉淀，然后去掉上层酒精得多糖粗品，将多糖粗品脱水、干燥，得鲽鱼鱼骨多糖。

进一步的，上述步骤（2）中，水的加入量为鱼骨质量的1~10倍，优选4~5倍。

进一步的，上述步骤（2）中，所用碱为氢氧化钠或氢氧化钾，碱的加入量为100~5000mmol/100g鱼骨，优选400~1200mmol/100g鱼骨；处理时间为30~600min。

进一步的，步骤（3）中，复合水解酶的用量优选为50~200U/g鱼骨，反应温度优选为45-55℃，反应时间优选为180-300min。

进一步的，上述步骤（4）中，先将鱼骨液pH调节至5.0~9.0，然后在60~90℃下过滤。

进一步的，上述步骤（5）中，除杂条件为：活性炭的加入量为滤液总量的1~20wt%，温度为20~100℃，时间为30~150min。

有益效果：本发明采用适合鲽鱼鱼骨的混合酶对鱼骨进行酶解，酶解时间短，提取率高，然后采用活性炭吸附除杂，使杂质去除彻底，避免了多次酒精沉淀，节省了酒精用量，降低了生产成本。本方法工艺简单、易于操作、能耗低，制得的鱼骨多糖颜色浅、纯度大，收率高。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行进一步阐述，下述说明只是示例性的，并不对本发明进行限制。所用的处理鱼骨的成分均能在市场上买到。

实施例1

取500g新鲜鲽鱼鱼骨，将鱼骨去肉、在95℃的温度下水煮60min，充分去除鱼骨中的油脂，然后将鱼骨清洗干净、粉碎。

称取100g粉碎的鲜鲽鱼鱼骨，加入200ml水，加入200mmol氢氧化钠，间歇搅拌300min，用稀盐酸调节pH至8.0，加入胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和脂肪酶质量比为5:1:1的复合水解酶50U/g鱼骨，在50℃，间歇搅拌180min，调节pH值为6.5，升温至85℃，过滤，滤液中加入15g活性炭, 60℃，间歇搅拌60min，过滤，向滤液中加入体积分数为95%的酒精，并不断搅拌，使得溶液中酒精的体积含量为70%，停止搅拌，静置至多糖充分沉淀，然后去掉上层酒精，将下层多糖脱水、干燥，得2.0g多糖。

实施例2