[发明专利]一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的检测装置及其检测方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体为一种用于检测原料乳和乳制品中β-内酰胺酶的检测装置及其检测方法。

背景技术

β-内酰胺酶（β-lactamase），俗称生鲜牛乳抗生素分解剂，又名解抗剂或金玉兰酶制剂，它是由革兰氏阳性细菌产生和分泌的，可选择性分解牛奶中残留的β-内酰胺类抗生素，使微生物法、酶联免疫法等常规的检测方法失效，从而无法正确判断是否为“无抗奶”，掩盖抗生素超标的事实。

β-内酰胺类抗生素是在牛奶生产中应用最广泛的抗生素，用于治疗牛乳房炎和其他细菌感染性疾病，如果不严格按照规定治疗牛乳炎等疾病，滥用抗生素，就会造成牛乳中的抗生素超标。由于抗生素的存在，一方面难以成为安全合格的产品，另一方面，还会影响酸奶、奶酪等奶制品的加工生产。Korycka-Dahl M.等（1985）利用β-内酰胺酶降解牛奶中残留的抗生素，可降低至常规检测方法无法检测的水平。一些不法分子将β-内酰胺酶用作牛奶中抗生素的分解剂，以掩盖其抗生素残留超标的事实，从而使抗生素超标奶变成合格奶，这就造成了外源性β-内酰胺酶的违法添加。

β-内酰胺酶能够使青霉素内酰胺结构破坏而失去活性，导致青霉素、头孢菌素等抗生素类药物耐药性增高，从而大大降低了人们抵抗传染病的能力，给消费者的身体健康带来危害。青霉素在β-内酰胺酶作用下，酶中亲核性基团向β-内酰胺环进攻，开环后可脱羧重排生成中间体青霉噻唑酸。以青霉素为代表的β-内酰胺类抗生素过敏反应非常普遍，引起过敏反应的基本物质有两种，一种是青霉素裂解生成一些青霉噻唑酸，与蛋白质结合形成抗原而致敏。另一种过敏源是一些高聚物，为β-内酰胺环开环后自身聚合而成，聚合程度越高，过敏反应越强。虽然由于添加β-内酰胺酶造成青霉素过敏的病例并未被研究证明，但根据青霉素的过敏机理，以及β-内酰胺酶的添加可能会造成β-内酰胺类抗生素耐药性的原因，确实应该对β-内酰胺酶的滥加提高警惕，严加管理。有些微生物虽然可以产生β-内酰胺酶，但由于采奶方式、牛奶的组分、消毒方法和包装储存方法等不适于产β-内酰胺酶微生物的生存，在非人为添加β-内酰胺酶的条件下是无法检测到微生物产生的β-内酰胺酶的。

2009年2月4日，根据卫生部等九部门《关于开展全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治的紧急通知》的规定，为配合全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治工作的深入开展，专项整治专家委员会提出《食品中可能违法添加的非食用物质名单》，其中就包括β-内酰胺酶。外源性β-内酰胺酶是我国不允许在食品中使用的化学物质，它的使用掩盖了牛奶中抗生素的残留的事实。

为了广大消费者的身体健康，维护乳制品市场良好的竞争环境，建立一种简单、方便、经济的乳制品中β-内酰胺酶的快速检测试纸已经是一个亟需解决的问题。

发明内容

为了克服上述现有技术中的不足，本发明的提供一种原料乳及乳制品中β-内酰胺酶检测试纸及其标准比色卡，并提供一种利用该试纸方便、快捷测定样品中β-内酰胺酶含量的方法。

一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的装置，包括检测试纸和β-内酰胺酶标准比色卡；其中所述的检测试纸由过滤层(1)、显色层(2)、吸水材料层(3)和基板(4)组成，过滤层(1)、显色层(2)、吸水材料层(3)粘贴在基板(4)上，且同时依次连接；其中所述的β-内酰胺酶标准比色卡由9个色块(5)组成，从浅到深对应于β-内酰胺酶浓度梯度分别为0U/mL、6U/mL、12U/mL、25U/mL、50U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL。

所述的检测试纸过滤层(1)用玻璃棉制成，显色层(2)由醋酸纤维素膜制成，吸水层(3)由中性滤纸制成，基板(4)由PVC薄片制成。

所述显色层(2)的制备包括步骤：配置0.5%～1.0 % 2,2'-联喹啉乙醇溶液和0.1~0.3mol/L CuSO₄溶液，混合均匀后，将醋酸纤维素膜浸入上述混合溶液5~10min后取出，放入真空干燥箱内40～80℃干燥20～50min后组装成检测试纸。

所述β-内酰胺酶标准比色卡的具体制备步骤如下：

(1)配制青霉素底物浓度为5000U/mL的溶液9份，分别加入浓度为0U/mL、6U/mL、12U/mL、25U/mL、50U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL β-内酰胺酶标准溶液，混合均匀后37℃水浴60min；