[发明专利]一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的检测装置及其检测方法有效
| 申请号: | 201110162413.6 | 申请日: | 2011-06-16 |
| 公开(公告)号: | CN102221547A | 公开(公告)日: | 2011-10-19 |
| 发明(设计)人: | 谢岩黎;韩小贤;林敏刚;张鑫潇;李雪琴;姚永志 | 申请(专利权)人: | 河南工业大学 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N33/52 |
| 代理公司: | 郑州科维专利代理有限公司 41102 | 代理人: | 张欣棠;马忠 |
| 地址: | 450001 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 原料 乳制品 内酰胺 装置 及其 方法 | ||
1.一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的装置,其特征在于:包括检测试纸条和β-内酰胺酶标准比色卡;所述的检测试纸由过滤层(1)、显色层(2)、吸水材料层(3)和基板(4)组成,过滤层(1)、显色层(2)、吸水材料层(3)粘贴在基板(4)上,且同时依次连接;其中所述的β-内酰胺酶标准比色卡由9个色块(5)组成,从浅到深对应于β-内酰胺酶浓度梯度分别为0U/mL、6U/mL、12U/mL、25U/mL、50U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL。
2.根据权利要求1所述的一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的装置,其特征在于:所述的检测试纸条过滤层(1)用玻璃棉制成,显色层(2)由醋酸纤维素膜制成,吸水层(3)由中性滤纸制成,基板(4)由PVC薄片制成。
3.根据权利要求1或2所述的一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的装置,其特征在于:所述显色层(2)的厚度为0.1~1mm,其制备步骤如下:配置0.5~1.0 % 2,2'-联喹啉乙醇溶液和0.1~0.3mol/L CuSO4溶液,混合均匀后,将醋酸纤维素膜浸入上述混合溶液5~10min后取出,放入真空干燥箱内40~80℃干燥20~50min,然后组装成检测试纸条。
4.根据权利要求1所述的一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的装置,其特征在于:所述β-内酰胺酶标准比色卡的具体制备步骤如下:
(1)配制青霉素底物浓度为5000U/mL的溶液9份,分别加入浓度为0U/mL、6U/mL、12U/mL、25U/mL、50U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL β-内酰胺酶标准溶液,混合均匀后37℃水浴60min;
(2)取出后加入5mL 10%~15%TCA,4000rpm离心10min,然后取制备的检测试纸条浸入上清液5min,进行显色反应;
(3)依据不同浓度的β-内酰胺酶标准液酶解液在试纸上的显色结果,制作标准色块,将标准色块按β-内酰胺酶标准品的浓度依次排列,粘贴,制得标准比色卡。
5.根据权利1或4所述的β-内酰胺酶标准比色卡,在特征在于:根据测色仪测量试纸显色的色度值,利用颜色模块软件对色彩数据进行模拟,制作标准比色块;或者利用计算机Adobe Photoshop编辑不同颜色的RGB值,编辑出与标准β-内酰胺酶浓度显色相匹配的颜色,制备出标准色块;按β-内酰胺酶标准溶液显色排列、粘贴,制成β-内酰胺酶标准比色卡。
6.根据权利要求1所述的一种用于检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的装置,其特征在于,用上述装置检测原料乳及乳制品中β-内酰胺酶的测定方法为:取原料乳或乳制品按1:1比例添加10%~15%的TCA,倒入离心管中,混合均匀后放入离心机,4000rpm离心10min,上清液备用;取β-内酰胺酶检测试纸条,浸入上述待测样品上清液进行显色反应5min,与β-内酰胺酶标准比色卡对照,即得到β-内酰胺酶的浓度范围。
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