[发明专利]用双指示线免疫层析半定量诊断甲胎蛋白的方法

权利要求书

1.一种用双指示线免疫层析半定量诊断甲胎蛋白的方法，其特征在于，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗AFP单克隆抗体1并均匀涂布于胶体金垫上，作为示踪标记物。在硝酸纤维素膜上，两个不同浓度的AFP单克隆抗体2固定于两个检测线(即T线)，羊抗鼠二抗固定于质控线(即C线)。依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸组装，剪成胶体金试纸并装入检测卡中。金标抗体与相应的抗原、抗体发生特异性结合被截留而显色，根据T线、C线显色与否来判断阴阳性结果。

2.根据权利要求1所述的一种用双指示线免疫层析半定量诊断甲胎蛋白的方法，其特征在于，抗体划线浓度为：

T1线用浓度为0.2mg/mL的AFP单克隆抗体2划线，用于检出20ng/mL的AFP；

T2线用浓度为0.1mg/mL的AFP单克隆抗体2划线，用于检出400ng/mL的AFP；

C线用3.5mg/mL羊抗鼠多克隆载体划线；

将硝酸纤维素膜置于40℃烘箱干燥3天。

3.根据权利要求1所述的一种用双指示线免疫层析半定量诊断甲胎蛋白的方法，其特征在于，运用不同浓度的抗体溶液在相同的基质上划线，以胶体金方法检测多个不同浓度水平物质的方法。