[发明专利]一种高纯度丹酚酸A的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于植物药物领域，特别是涉及一种高纯度丹酚酸A的制备方法。 

背景技术

丹参是唇形科鼠尾草属植物，作为我国常用中药材已有悠久的临床应用历史，在心血管疾病的治疗中具有重要的地位，其显著的疗效已得到临床上的广泛认可。丹参的有效化学成分主要有两大类：脂溶性丹参酮类化合物和水溶性丹酚酸类化合物。丹酚酸具有广泛的抗脂质过氧化和清除自由基等作用，在已知酚类化合物中丹参酚酸类化合物的抗氧化活性最强,其中又以丹参酚酸A(简称丹酚酸 A)抗氧化活性最强。丹酚酸A具有良好的脂溶和透膜能力，与丹参中大部分酚酸类物质相比，其细胞渗透能力更强，生物利用度更高。因此，丹酚酸A具有很高的药用开发价值。 

但是，在丹参中的丹酚酸A的天然含量极低(约为丹参药材的0.01～0.06％)，从丹参中提取丹酚酸A不仅原药材成本过高，分离纯化难度也大，严重制约着该产品的研究和开发，成为其产业化的瓶颈。 

 近年来为解决丹酚酸A的来源问题，人们尝试从丹参中对丹酚酸A进行转化，发现通过丹酚酸B的降解可以得到一定量的丹酚酸A，而丹酚酸B也是丹参中重要的有效成分。如中国专利200710001055.4公开了一种丹参丹酚酸A的制备方法，是通过对丹酚酸B降解处理而获得丹酚酸A。由于丹参中还含有重要的脂溶性有效成分如丹参酮IIA、隐丹参酮等，显然，以牺牲丹参众多的有效成分而仅仅获得丹酚酸A的做法不符合科学合理、充分利用资源的理念。此外，丹参这味药材用途很多，很多中成药如丹参注射液、复方丹参片、复方丹参滴丸等均需用丹参提取，需要消耗大量的丹参药材。 

此外，在相关学科学者的研究中指出：丹参的栽培并不很容易，丹参喜生长在气候温和、阳光充足、空气湿润的地方，生长最适温度为20~ 26℃，最适空气相对湿度为80%。其根系发达，怕旱又忌涝。丹参种植时宜选择土层深厚、疏松肥沃、地势较高、排水良好的砂质壤土地块种植。平地要作排水沟；山地、岭地宜选向阳的低山坡，坡度不宜太大，10~30 度较好，土壤pH 值为6.5~7.5 之间。而且丹参不宜连作，通过对1~ 4年不同连作年限地块丹参生长发育情况调查发现，连作严重危害丹参生长，主要表现在6~ 9月份生长期枯苗率大幅度上升，地上、地下部生长量下降，根系数量、直径和长度减小，产量降低，根系外观畸形，有效成分含量降低，这也在一定程度上影响了丹参的产量。 

因此，丹参的栽培状况以及其众多的用途注定会使丹参供不应求，近年来丹参的价格飙升已经证明了这一点。要使得丹酚酸A的制备水平达到产业化，必须寻找新的资源来解决丹酚酸A的来源问题。 

发明内容

本发明的目的旨在：提供一种能够获取丹酚酸A新来源，以及从中获得高纯度丹酚酸A的制备方法；既解决丹酚酸A的来源问题，同时也提供一种收率高、成本低、制备工艺过程简单，利于产业化生产高纯度丹酚酸A的工艺方法。 

这种高纯度丹酚酸A的制备方法，其特征在于：它以紫草为原料，通过水加热提取及酸调转化、树脂吸附、洗脱分离和纯化浓缩工序获得高纯度丹酚酸A。 

具体制备方法，包括如下步骤：（1）提取、（2）转化，（3）分离，（4）纯化； 

（1）提取：将药材紫草根及根茎的切片在温度为70~100℃的水中加热至少提取二次，合并过滤后获得提取液；

（2）转化：将提取液适度浓缩，并以浓度为0.1~2mol/L的无机酸调节pH值至1-6，在100℃下回流反应；或将浓缩液置于高压釜中加热反应，获得含有高浓度丹酚酸A的转化液；

（3）分离：将转化液用填充了非极性、弱极性或中极性大孔吸附树脂的吸附柱进行吸附，待吸附平衡后，用水进行洗脱除去杂质，然后以水/醇溶剂系统洗脱分离，收集3～5个柱体积后即获得含丹酚酸A的洗脱液；

（4）纯化：将此洗脱液经浓缩后上聚酰胺、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、MCI GEL CHP20P、C4、C8或C18键合相硅胶柱制备，以水/醇溶剂系统洗脱，或以液滴逆流色谱纯化，收集含有高纯度丹酚酸A的流份，经浓缩干燥后得到高纯度丹酚酸A产品。

所述步骤（2）中采用的无机酸为盐酸、硫酸、硝酸、磷酸中的任一种酸；回流状态下反应时间为2~24小时；在高压釜中的加热反应条件为：温度101~152℃,压力0.1~0.5Mpa,反应时间为0.5~12h。