[发明专利]一种参薯糖蛋白及制备方法

权利要求书

1.一种参薯糖蛋白，其特征在于该参薯糖蛋白分子量约为12500Da～14500Da，该参薯糖蛋白中单糖的组成包括L-半乳糖、D-葡萄糖、D-甘露糖。

2.如权利要求1所述的一种参薯糖蛋白，其特征在于该参薯糖蛋白组分在280nm处有蛋白质特征吸收值。

3.如权利要求1或2所述的一种参薯糖蛋白的制备方法，其特征在于采用浸提、浓缩、去杂蛋白、醇析，再经DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-75 柱层析纯化、浓缩、冷冻干燥，最终得本发明的参薯糖蛋白。

4.如权利要求3所述的一种参薯糖蛋白的制备方法，其特征在于其具体制备过程包括如下步骤：

（1）、原料的预处理

取新鲜参薯，洗静、去皮，切成10cm长的小块；

（2）、浸提

在步骤（1）所获得的参薯原料中先加入参薯质量5倍的0.1～2.0%NaCl溶液、用捣碎机捣碎至20-40目大小，再加入参薯质量10～15倍的0.1～2.0%NaCl溶液、搅均，在45～50℃下浸提1～3h，浸提液以3000～5000r/min，离心10～20 min，收集上清液；

（3）、浓缩

将步骤（2）获得的上清液减压浓缩至原体积的1/10～1/15，浓缩过程控制压力为-0.08～-0.1Mpa，温度为40～45℃；

（4）、萃取

在步骤（3）获得的浓缩液中加入浓缩液0.5～0.8倍体积的氯仿和正丁醇混合液，混合液中氯仿与正丁醇体积比为4：1，置于30～40℃的水浴振荡器中，50～100r/m振荡10 min，然后以4000～5000r /min，离心10～20min，收集上层清液；

再在上层清液中加入其0.5～0.8倍体积的氯仿和正丁醇混合液，混合液中氯仿与正丁醇体积比为4：1，再置于30～40℃的水浴振荡器，50-100r/m，振荡10min，以4000～5000r/min，离心10～20min，收集最终上层清液；

（5）、醇析

向步骤（4）获得的最终上层清液中加90～95%食用酒精，使溶液中的酒精终浓度为75～85%，搅匀静置24h析出沉淀，以4000～5000r /min，离心10～20min，收集沉淀；

（6）、柱层析

向步骤（5）获得沉淀加入5mmol/L磷酸缓冲液溶解，经上DEAE-52 纤维素柱层析，先用0.05 mol/L NaCl洗脱,然后用0.1 mol/L NaCl洗脱，收集粗糖蛋白组分；

将所收集的粗糖蛋白组分再上Sephadex G-75柱层析用去离子水洗脱，收集参薯糖蛋白组分； 

（7）浓缩

将步骤（6）获得的参薯糖蛋白组分减压浓缩至含水量为20～25%的浓稠物，浓缩过程控制压力为-0.08～-0.1Mpa，温度为45～50℃；

（8）、冷冻干燥

将步骤（7）中获得的粘稠状参薯糖蛋白组分进行冷冻干燥，控制温度-20～-35℃，30~60Pa抽真空冷冻1~2h；将温度升到-5～-10℃，保持5~20 h，温度再升到30～40℃保持5～10 h，即得到本发明的参薯糖蛋白成品。