[发明专利]一种检测光滑假丝酵母菌的实时荧光定量PCR试剂盒

权利要求书

1.光滑假丝酵母菌特异性的正向引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.光滑假丝酵母菌特异性的反向引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

3.光滑假丝酵母菌的特异性探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

4.如权利要求3所述的特异性探针，其特征在于所述探针的两端分别结合有荧光发生基团FAM和荧光淬灭基团ECLIPSE。

5.一种检测光滑假丝酵母菌的实时荧光定量PCR试剂盒，其特征在于包括如下物质：

PCR反应液、引物探针混合液、PCR反应酶、纯 H₂O、阳性定量标准品。

6.如权利要求5所述的检测光滑假丝酵母菌的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述PCR反应液由Tris-HCl(50mmol/L, pH8.0)、MgCl₂(8mmol/L)和KCl(250mmol/L)组成。

7.如权利要求5所述的检测光滑假丝酵母菌的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述引物探针混合液中引物浓度均为0.2mmol/L，探针浓度均为0.1mmol/L。

8.如权利要求5所述的检测光滑假丝酵母菌的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述PCR反应酶由Hotstart Taq DNA聚合酶和dNTPs组成，其中每人份PCR反应酶系中Hotstart Taq DNA聚合酶的用量为5U，dNTPs用量为10mmol/L。

9.如权利要求5所述的检测光滑假丝酵母菌的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于还含有阴性质控品和阳性质控品，所述阴性质控品为生理盐水，所述阳性质控品为灭活的光滑假丝酵母菌菌液，菌液浓度为5.0×10³~5.0×10⁶拷贝/mL。

10.如权利要求5所述的检测光滑假丝酵母菌的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于所述定量阳性模板为含有序列为SEQ ID NO：4的DNA片段的pMD19-T重组质粒。