[发明专利]球虫细胞培养模型及其应用无效
| 申请号： | 201110115932.7 | 申请日： | 2011-05-05 |
| 公开（公告）号： | CN102220279A | 公开（公告）日： | 2011-10-19 |
| 发明（设计）人： | 姜连连;黄兵;韩红玉;董辉;赵其平;朱顺海;马卫娇;曾艳波;程军;李婷;孔春林 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073;C12Q1/02;G01N15/10 |
| 代理公司： | 上海大邦律师事务所 31252 | 代理人： | 周东萍 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞培养 模型 及其 应用 | ||
1.一种球虫细胞培养模型，其特征在于，所述球虫细胞培养模型是通过将柔嫩艾美耳球虫子孢子接种入鸡胚成纤维细胞系DF-1细胞，并使其在DF-1细胞中发育至第一代裂殖子而建成。
2.一种球虫细胞培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
将柔嫩艾美耳球虫子孢子接种入DF-1细胞，并使其在DF-1细胞中发育至第一代裂殖子。
3.根据权利要求2所述的球虫细胞培养方法，其特征在于，所述DF-1细胞在接入子孢子之前，该DF-1细胞以1～50万个细胞/孔的细胞铺板剂量铺被微孔板。
4.根据权利要求3所述的球虫细胞培养方法，其特征在于，所述DF-1细胞在接入子孢子之前，该DF-1细胞以10万个细胞/孔的细胞铺板剂量铺被微孔板。
5.根据权利要求3所述的球虫细胞培养方法，其特征在于，所述柔嫩艾美耳球虫子孢子的接种剂量为30万个/孔。
6.根据权利要求2所述的球虫细胞培养方法，其特征在于，所述DF-1细胞在接入子孢子之后，细胞培养基中添加浓度小于等于5％的血清。
7.一种球虫子孢子入侵活力的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
用荧光探针标记柔嫩艾美耳球虫子孢子；
将荧光标记的子孢子接种入DF-1细胞培养；
用流式细胞仪检测球虫子孢子的入侵细胞数，并用下述公式计算出子孢子的入侵率，子孢子的入侵率＝100％×[入侵细胞数/(未入侵细胞数+入侵细胞数)]。
8.根据权利要求7所述的球虫子孢子入侵活力的检测方法，其特征在于，在荧光标记的子孢子接种入DF-1细胞后8～12小时，用流式细胞仪检测该球虫子孢子的入侵细胞数。
9.根据权利要求7所述的球虫子孢子入侵活力的检测方法，其特征在于，所述子孢子在荧光标记后的48小时内用于接种DF-1细胞。
10.权利要求1所述球虫细胞培养模型的应用，其特征在于，用于筛选抗球虫药物。
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