[发明专利]注射用重组人白细胞介素-12制剂及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制剂及制备方法，具体发的说，涉及一种注射用重组人白细胞介素-12制剂及制备方法，属于医药制备技术领域。

背景技术

白介素-12(IL-2)是人体内重要的细胞因子，可提高辅助性T细胞数量和活性以增强整体的免疫功能，通过调节NK细胞和巨噬细胞介导的非特异性的免疫和Th1、CTL介导的特异性免疫作用，产生一系列的生物效应。国外重组人白细胞介素-12(rhIL-12)的临床试验方案已达30多项，涉及多种传染病(如乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病)，多种肿瘤(如黑色素瘤、肾癌、直肠癌、前列腺癌、宫颈癌等)，自身免疫性疾病和哮喘等，但至今仍未批准上市，将白介素-12制备成使用方便，易于人体吸收、代谢的剂型，显的尤为重要。

发明内容

针对上述问题，本发明公开一种注射用重组人白细胞介素-12制剂及制备方法。

本发明的前一个目的是，提供一种注射用重组人白细胞介素-12制剂，每毫升制剂含有下述成分：2.5～10μg的重组人白细胞介素-12，50mg的填充剂，5～20mg的冻干保护剂，2.30mg的磷酸氢二钠，0.52mg的磷酸二氢钠和7.02mg的氯化钠。

上述的注射用重组人白细胞介素-12制剂，所述的制剂含2.5μg或5μg或10μg的重组人白细胞介素-12。

上述的注射用重组人白细胞介素-12制剂，所述的填充剂为甘氨酸、甘露醇、右旋糖酐的其中之一或者它们的组合物。

进一步的，上述的注射用重组人白细胞介素-12制剂，所述的填充剂优选为甘露醇。

上述的注射用重组人白细胞介素-12制剂，其中，所述的冻干保护剂为人血白蛋白、蔗糖、海藻糖、乳糖、葡萄糖中的其中之一或者它们的组合物；填充剂优选人血白蛋白。

本发明的后一个目的是，提供的该制剂的制备方法，依次包括下述步骤：

(1)将重组人白细胞介素-12原料自-10℃以下冰箱取出，放置4℃下冻融，待用。

(2)按配方量称取磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠，加入注射用水搅拌10～15min，使完全溶解，用氢氧化钠或盐酸调节pH值至6.8～7.8，定容至配方量。

(3)取出上述溶液，加入配方量的填充剂搅拌10～15min，使完全溶解，再加入配方量的冻干保护剂和重组人白细胞介素-12搅拌2min至物料均匀，无菌过滤，100级车间内无菌分装，每瓶1ml。

(4)开启冻干机，设置或调出冻干程序：预冻4小时后升温到-10℃，保持-10℃5小时，升温到30℃保持4小时，结束。

(5)程序结束后退出程序，压塞、扎盖即得。

上述的制备方法中，步骤(4)中所述的预冻降温至-40℃，需要40分钟，再在-40℃保持3小时，冷阱准备20分钟。

上述的制备方法中，步骤(4)中从所述的从-40℃升温到-10℃用5小时，从-10℃升温到30℃用6小时。

与现有技术相比，本发明所公开的注射用重组人白细胞介素-12制剂及制备方法，所得的产品外观良好，水分低，不会降低生产的rhIL-12的蛋白含量和生物活性，稳定性好，制备方法简单。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步地详细说明，但不构成对本发明的任何限制。

实施例

临床研究表明，重组人白细胞介素-12(rhIL-12)临床用药剂量为1-500ng/kg，但在300-500ng/kg的剂量水平，部分人表现出肝功能异常，口腔溃疡等毒副作用，较为安全有效的剂量在50ng-250ng/kg，而根据中国人的体重在50-60kg左右，本品的单瓶规格定为：rhIL-122.5、5或10μg/制剂单位。

制剂配方形成的制剂为冻干粉针剂，在进行配方筛选时以冻干粉外观性状及rhIL-12含量和生物学活性测定为筛选依据。

rhIL-12为由两个亚基通过二硫键结合形成的糖蛋白，易溶于水，其在pH7.4的磷酸盐缓冲液中稳定，故采用了磷酸氢二钠和磷酸二氢钠作为pH缓冲剂。每瓶制剂含有磷酸氢二钠2.30mg和磷酸二氢钠0.52mg，制成的制剂pH值约为7.4。同时加入氯化钠作为渗透压调节剂，加入量为每瓶7.02mg。