[发明专利]酵母展示脂肪酶催化合成果糖棕榈酸酯的方法无效
申请号: | 201110109007.3 | 申请日: | 2011-04-28 |
公开(公告)号: | CN102212578A | 公开(公告)日: | 2011-10-12 |
发明(设计)人: | 阮晖;周陈伟;迪拉热木;徐娟;王睿之;林吉恒;何国庆 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12P19/02 | 分类号: | C12P19/02;C12N15/63;C12N1/19;C12N9/20;C12R1/84 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酵母 展示 脂肪酶 催化 合成 果糖 棕榈 方法 | ||
1.一种酵母展示脂肪酶催化合成果糖棕榈酸酯的方法,包括:
将果糖和棕榈酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得果糖棕榈酸酯;
所述的酵母展示脂肪酶通过如下方法制备:
将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;
所述的重组质粒由原始载体pPIC9K和依次插入原始载体pPIC9K中MFα1信号肽下游的脂肪酶基因和毕赤酵母GS115的细胞壁α凝集素基因组成。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,以每升有机溶剂计,果糖、棕榈酸和酵母展示脂肪酶的加入量分别为20~100g、50~100g、1~2g。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的有机溶剂为丙酮。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述生物印迹中所用配体为油酸。
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