[发明专利]一种中药组合物中知母皂苷BⅡ的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药组合物中知母皂苷BⅡ的含量测定方法。

背景技术

CN1833703A公开了一种治疗糖尿病周围神经病变的药物及制备方法，该中药组合物中含有原料药材知母，知母中富含甾体皂苷、双苯吡酮类、黄酮类、木脂素类、多糖类、有机酸类及微量元素等成分。而其中,甾体皂苷类为主要成分,其在根茎中的量约为6 % ,且种类繁多。其中知母皂苷BⅡ为该药材中的重要成分，常作为中药组合物中含量检测指标进行质量控制，常见的测定方法为薄层扫描法，高效液相色谱法等，但是，由于中成药成分复杂，往往不同的中药组合物，知母皂苷BⅡ的含量测定方法会有所不同，原因主要是由于中药组合物中不同原料存在干扰，因此，同一成分的测定方法在不同的中药组合物中，很难采用同一种方法测定，每种中药组合物的测定方法都需要严格的方法筛选才能确定。

本发明是在CN1833703A专利的基础上进行的改进发明，在此全文引用该专利文件记载的内容。

发明内容

本发明目的是提供一种中药组合物中知母皂苷BⅡ的含量测定方法，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪300-400份、生地黄300-400份、鸡血藤300-400份、桂枝80-120份、当归100-150份、川芎150-200份、荔枝核150-200份、知母80-120份、桑枝80-120份、徐长卿80-120份、延胡索70-120份 、麻黄50-100份、地龙30-60 份；

该方法采用高效液相色谱法，色谱条件和测定法如下：

色谱条件：色谱柱C₁₈，规格为4.6mm×250mm，5μm；流动相为乙腈：水-24:76；蒸发光散射检测器漂移管温度为75℃，加热级别为66%，载气流速为25psi，柱温为30℃，流速为1.0ml/min，理论塔板数以知母皂苷BⅡ计不少于6000；

供试品溶液的制备：取上述中药组合物制剂内容物或研细的粉末2.0g，精密称定，置具塞三角瓶中，精密加入25%乙腈50ml，称重，超声提取30分钟，放冷，用25%乙腈补足减失的重量，过滤，取续滤液25ml，回收溶剂至近干，残渣用约50ml水溶解，通过AB-8大孔吸附树脂柱，规格为内径1.5cm，长10cm，分别用氨试液50ml、20%乙醇50ml洗脱，弃去；再用80%乙醇洗脱100ml，收集洗脱液，蒸干，残渣用25%乙腈溶解，并转移至10ml量瓶中，加25%乙腈至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

对照品溶液的制备：精密称取知母皂苷BⅡ对照品10mg置10ml量瓶中，加25%乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，作为母液，精密量取1ml母液置10ml量瓶中，加25%乙腈稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；

测定法：分别精密吸取对照品溶液15μl、30μl，供试品溶液15μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。

外标两点法即对照品进样质量的自然对数与其相应的峰面积的自然对数这两点做对数方程，将供试品峰面积取自然对数后代人方程从而求得供试品的含量。

优选地，该中药组合物由如下重量份的原料药制成:

黄芪340份、生地黄340份、鸡血藤340份、桂枝113份、当归136份、川芎170份、荔枝核170份、知母113份、桑枝113份、徐长卿102份、延胡索91份、麻黄68份、地龙45份。

或：

黄芪300份、生地黄300份、鸡血藤300份、桂枝80份、当归100份、川芎150份、荔枝核150份、知母80份、桑枝80份、徐长卿80份、延胡索70份、麻黄50份、地龙30份。

或：

黄芪400份、生地黄400份、鸡血藤400份、桂枝120份、当归150份、川芎200份、荔枝核200份、知母120份、桑枝120份、徐长卿120份、延胡索120份、麻黄100份、地龙60份。

或：

黄芪300份、生地黄300份、鸡血藤300份、桂枝120份、当归150份、川芎150份、荔枝核200份、知母120份、桑枝120份、徐长卿120份、延胡索120份、麻黄100份、地龙60份。

更优选地，本发明中药组合物的活性成分由下列成分组成：

1)黄芪、麻黄、桑枝、延胡索、鸡血藤、川芎，分别加8-12倍量50-80%乙醇，回流提取1-3次，提取时间分别为1-3小时，过滤，合并提取液，残渣弃去，回收乙醇至无醇味，减压浓缩至60℃热测时相对密度1.02-1.06的流浸膏;