[发明专利]从大豆中提取分离大豆异黄酮单体化合物的方法

权利要求书

1.从大豆中提取分离大豆异黄酮单体化合物的方法，其特征是，步骤为：

（1）大豆异黄酮提取物的制备：脱脂大豆豆粕，用乙醇或甲醇浸泡，用5-20倍体积的乙醇或甲醇渗漉提取，渗漉液经回收至无醇后喷雾干燥得到提取物粗粉，将提取物粗粉用丙酮回流提取、浓缩结晶，得到大豆异黄酮提取物；

（2）柱层析纯化：将大豆异黄酮提取物用甲醇溶解，上Superose 12柱进行层析分离纯化，用甲醇-水或乙醇-水为洗脱液进行洗脱，洗脱液流速为每小时1-10倍柱体积，流出液由紫外检测器在254 nm检测，收集目标组分馏分，将得到的馏减压浓缩，得到高纯度的黄豆黄苷、大豆苷、染料木苷、黄豆黄素、大豆苷元、染料木素等多种大豆异黄酮单体化合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）渗漉提取时使用带有夹套加热保温的双层渗漉柱，介质温度为30-80℃，渗漉液流速为1-5倍柱体积/小时。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征是，介质温度为40-60℃（优选50℃），渗漉液流速为2-4倍柱体积/小时（优选3倍柱体积/小时）。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）用乙醇或甲醇浸泡脱脂大豆豆粕时，乙醇或甲醇的质量浓度为40%-85%（优选50%-80%，更优选60%），浸泡时间为6-12小时（优选7-10小时，更优选8小时）。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）渗漉提取时所用乙醇或甲醇的质量浓度为40%-85%（优选50%-80%，更优选60%）。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）回流提取提取物粗粉时所用丙酮质量浓度为80%-100%（优选85%-95%，更优选90%）。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（2）洗脱液为20%-80%的甲醇-水洗脱液。

8.根据权利要求1或7所述的方法，其特征是，洗脱方式为等度、分步或梯度。

9.根据权利要求1或7所述的方法，其特征是，洗脱液为60%甲醇-水等度洗脱/50%甲醇-水等度洗脱/40%甲醇-水和60%甲醇-水梯度洗脱/30%甲醇-水和70%甲醇-水梯度洗脱。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征是，用洗脱液进行洗脱时，洗脱液流速为每小时3-8倍柱体积（优选每小时5倍柱体积）。