[发明专利]一种基于免疫方法的细菌自动分选标记方法和装置有效

专利信息
申请号: 201110089247.1 申请日: 2011-04-11
公开(公告)号: CN102243234A 公开(公告)日: 2011-11-16
发明(设计)人: 程智;吴太虎;陈锋;杜耀华;顾彪;杨子健;崔秀美 申请(专利权)人: 中国人民解放军军事医学科学院卫生装备研究所
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/533
代理公司: 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 代理人: 张金亭
地址: 300161 *** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 免疫 方法 细菌 自动 分选 标记 装置
【权利要求书】:

1.一种基于免疫方法的细菌自动分选标记方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)磁珠包被抗体分子:将磁珠、交联剂和抗体分子混合,得到交联有抗体分子的免疫磁珠,所述免疫磁珠上交联的抗体能与目的细菌特异性结合;

2)荧光物质包被抗体分子:将荧光物质、交联剂和抗体分子混合,得到交联有抗体分子的免疫荧光物质,所述荧光物质交联的抗体分子能与目的细菌特异性结合;

3)将待测样品液加入分选标记单元的样品液腔,将免疫磁珠加入分选标记单元的磁珠腔,将交联有抗体分子的荧光物质加入分选标记单元的荧光物质腔,将清洗液加入分选标记单元的清洗液腔;

4)免疫磁珠与目的细菌的结合:在控制单元的控制下,电机驱动选通滑块在滑轨上移动,首先选通磁珠腔,磁珠腔电磁阀打开,注射泵将免疫磁珠吸入中转柱,磁珠腔电磁阀关闭;电机驱动选通滑块在滑轨上移动至样品液腔,样品液腔电磁阀打开,注射泵将免疫磁珠注入样品液腔,样品液腔中的待测样品液与免疫磁珠充分混匀,使目的细菌表面抗原和免疫磁珠交联的抗体充分发生特异性结合,免疫磁珠完成对目的细菌的捕获,得到免疫磁珠与目的细菌复合物;

5)磁分离:加磁场,将免疫磁珠与目的细菌复合物吸附到样品液腔的内壁;

6)清洗:注射泵将样品液腔中的液体吸入中转柱,关闭样品液腔电磁阀;在控制单元的控制下,电机驱动选通滑块在滑轨上移动,选通滑块移动至分选标记单元的废液腔,废液腔电磁阀打开,注射泵将中转柱中的液体注入废液腔,废液腔电磁阀关闭;选通滑块移动至清洗液腔,清洗液腔电磁阀打开,注射泵将清洗液吸入中转柱,清洗液腔电磁阀关闭;选通滑块移动至样品液腔,样品液腔电磁阀打开,注射泵将清洗液注入样品液腔,冲洗样品液腔;重复上述清洗过程,直到得到纯化的磁珠-目的细菌复合体;

7)荧光物质标记目的细菌:在控制单元的控制下,电机驱动选通滑块选通荧光物质腔,荧光物质腔电磁阀打开,注射泵将交联有抗体分子的荧光物质吸入中转柱,荧光物质腔电磁阀关闭;电机驱动选通滑块在滑轨上移动至样品液腔,样品液腔电磁阀打开,注射泵将交联有抗体分子的荧光物质注入样品液腔,撤销磁场,样品液腔中的磁珠-目的细菌复合体与交联有抗体分子的荧光物质充分混匀,使目的细菌表面抗原和荧光物质交联的抗体分子充分发生特异性结合,使荧光物质结合在目的细菌表面,形成磁珠-目的细菌-荧光物质复合体,完成对目的细菌的染色;加磁场,将磁珠-目的细菌-荧光物质复合体吸附到样品液腔内壁,重复步骤6),直到在样品液腔得到纯化的磁珠-目的细菌-荧光物质复合体。

2.根据权利要求1所述的基于免疫方法的细菌自动分选标记方法,其特征在于,所述磁珠所包被的抗体分子是至少两种目的细菌的抗体分子,所述荧光物质所包被的抗体分子是至少两种目的细菌的抗体分子。

3.根据权利要求1或2所述的基于免疫方法的细菌自动分选标记方法,其特征在于,所述磁珠所包被的抗体分子为目的细菌表面抗原单克隆抗体或二抗再偶联单克隆抗体。

4.根据权利要求1或2所述的基于免疫方法的细菌自动分选标记方法,其特征在于,所述荧光物质所包被的抗体分子为目的细菌表面抗原单克隆抗体或二抗再偶联单克隆抗体。

5.根据权利要求1所述的基于免疫方法的细菌自动分选标记方法,其特征在于,所述荧光物质为单色量子点、荧光编码量子点、多量子点镶嵌组装微球和荧光染料中的任意一种。

6.根据权利要求1所述的基于免疫方法的细菌自动分选标记方法,其特征在于,所述磁珠所包被的抗体分子与所述荧光物质所包被的抗体分子不同。

7.实现权利要求1所述自动分选标记方法的装置,其特征在于,包括控制单元、液样传输单元和分选标记单元;

所述分选标记单元设置有相互独立的磁珠腔、荧光物质腔、清洗液腔、废液腔和样品液腔,所述样品液腔的外围设有可撤销磁场;

所述液样传输单元包括依次相连的注射泵、中转柱和选通滑块,所述选通滑块安装在滑轨上,所述选通滑块设有驱动电机,所述控制单元控制电机驱动选通滑块与磁珠腔、荧光物质腔、清洗液腔、废液腔和样品液腔中的任意一个连接,在所述磁珠腔、荧光物质腔、清洗液腔、废液腔和样品液腔与选通滑块连接的通道上均设有电磁阀。

8.根据权利要求7所述的自动分选标记装置,其特征在于,所述样品液腔的外围设有电磁铁。

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