[发明专利]一种融合蛋白TAT-OCT4及其编码基因与应用有效
| 申请号: | 201110084049.6 | 申请日: | 2011-04-02 |
| 公开(公告)号: | CN102190735A | 公开(公告)日: | 2011-09-21 |
| 发明(设计)人: | 戴建武;曹佳妮;陈冰;肖志峰 | 申请(专利权)人: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/00;C12N5/07;C12R1/91 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
| 地址: | 100101 北京市朝阳区北辰西*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 融合 蛋白 tat oct4 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种蛋白,包括TAT跨膜肽以及结合在所述TAT跨膜肽的氨基端或羧基端的细胞重编程相关因子;
所述细胞重编程相关因子为OCT4转录因子、c-myc因子、klf4因子或SOX2因子;所述OCT4转录因子的氨基酸序列如序列表中序列6所示。
2.如权利要求1所述的蛋白,其特征在于:所述TAT跨膜肽是如下1)或2)所述的多肽:
1)序列表中序列2所示的氨基酸残基组成的多肽;
2)序列表中序列2所示的氨基酸残基序列的N末端和/或C末端加上1-10个任意氨基酸残基且具有跨膜功能的由1)衍生的多肽;
所述TAT跨膜肽2)是如下a)或b)或c):
a)在序列表中序列2所示的氨基酸残基序列的C末端加上序列表中序列4所示的HA标签;
b)在序列表中序列2所示的氨基酸残基序列的N末端加上His标签;
c)在序列表中序列2所示的氨基酸残基序列的C末端加上序列表中序列4所示的HA标签并在序列表中序列2所示的氨基酸残基序列的N末端加上His标签。
3.如权利要求1或2所述的蛋白,其特征在于:所述蛋白是如下I)或II)的蛋白质:
I)其氨基酸序列如序列表中序列8的第22-403位所示;
II)其氨基酸序列如序列表中序列8所示。
4.权利要求1-3中任一所述的蛋白的编码基因。
5.如权利要求4所述的基因,其特征在于:所述基因是如下1)或2):
1)其核苷酸序列如序列表中序列7的第64-1212位;
2)其核苷酸序列如序列表中序列7所示。
6.含有权利要求4或5所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
7.如权利要求6所述的重组表达载体,其特征在于:所述重组表达载体是将权利要求4或5所述的基因插入载体pET-28a的多克隆位点得到的载体。
8.权利要求1-3中任一所述的蛋白或权利要求4或5所述的基因在制备如下(1)-(4)中任一所述产品中的应用:
(1)促进细胞向诱导性多潜能干细胞转变的产品;
(2)促进细胞增殖的产品;
(3)促进细胞中内源NANOG转录因子或OCT4转录因子表达量增强的产品;
(4)促进细胞中细胞周期蛋白表达量增强的产品。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于:所述NANOG转录因子的氨基酸序列如序列表中序列10所示;所述NANOG转录因子的编码基因如序列表中序列9所示;所述细胞周期蛋白是CDC25A或CDK6。
10.如权利要求8或9所述的应用,其特征在于:所述细胞是成纤维细胞;优选是是HAF细胞。
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