[发明专利]AaPMT和AaTRI双基因共转化提高三分三毛状根中托品烷生物碱含量的方法

权利要求书

1.AaPMT和AaTRI双基因共转化提高托品烷生物碱含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将腐胺N-甲基转移酶基因AaPMT和托品酮还原酶I基因AaTRI，插入植物表达载体，构建重组载体；所述的腐胺N-甲基转移酶基因和托品酮还原酶I基因序列分别为SEQ ID：1和SEQ ID：2的DNA序列；

(2)将步骤(1)所获得的重组载体转入发根农杆菌，构建含有重组载体的发根农杆菌；

(3)用步骤(2)所得含有重组载体的发根农杆菌介导腐胺N-甲基转移酶基因和托品酮还原酶I基因转化三分三，获取毛状根；

(4)检测步骤(3)毛状根中的腐胺N-甲基转移酶基因和托品酮还原酶I基因，取筛选结果为阳性的转基因毛状根。

2.权利要求1所述AaPMT和AaTRI双基因共转化提高脱品烷生物碱的含量的方法，其特征在于，所述其特征在于，步骤(1)所述的植物表达载体为pCAMBIA质粒或pBI质粒。

3.权利要求1所述AaPMT和AaTRI双基因共转化提高脱品烷生物碱含量的方法，其特征在于，所述其特征在于，步骤(2)所述发根农杆菌为发根农杆菌菌株C58C1、发根农杆菌菌株A4或发根农杆菌菌株LBA9402。

4.权利要求1所述AaPMT和AaTRI双基因共转化提高脱品烷生物碱的含量的方法，其特征在于，步骤(3)用含有重组载体的发根农杆菌菌株遗传转化三分三的外植体，获得毛状根。

5.权利要求1所述AaPMT和AaTRI双基因共转化提高脱品烷生物碱含量的方法，其特征在于，步骤(4)所述检测方法为PCR检测、半定量和定量RT-PCR测定。

6.一种用于提高脱品烷生物碱含量的重组载体，其特征在于，含有腐胺N-甲基转移酶基因和托品酮还原酶I基因。