[发明专利]一种检测植物中目标蛋白的方法及其专用SPR生物传感器有效

专利信息
申请号: 201110081230.1 申请日: 2011-03-31
公开(公告)号: CN102156193A 公开(公告)日: 2011-08-17
发明(设计)人: 麻密;徐文忠;赵卓亚;何振艳;申红玲 申请(专利权)人: 中国科学院植物研究所
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;任凤华
地址: 100093 北京市海淀区香*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 植物 目标 蛋白 方法 及其 专用 spr 生物 传感器
【权利要求书】:

1.如下权利要求7-10中任一所述SPR生物传感器在辅助检测生物中目标蛋白中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述生物为植物;所述目标蛋白为抗虫蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:

所述植物为转入所述目标蛋白的编码基因的植物。

4.根据权利要求1-3中任一所述的应用,其特征在于:

所述抗虫蛋白为Cry1Ac蛋白。

5.根据权利要求1-4中任一所述的应用,其特征在于:

所述Cry1Ac蛋白为如下(a)或(b)的蛋白质:

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;

(b)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列2衍生的蛋白质。

6.根据权利要求1-5中任一所述的应用,其特征在于:

所述Cry1Ac蛋白的编码基因为如下1)或2)或3)所示的基因:

1)序列表中序列1所示的DNA分子;

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能蛋白的DNA分子;

3)与1)限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有相同功能蛋白的DNA分子。

7.一种用于辅助检测待测生物中目标蛋白的SPR生物传感器,为将抗目标蛋白抗体以共价结合的方式偶联到传感芯片上,得到SPR生物传感器。

8.根据权利要求7所述的生物传感器,其特征在于:

所述抗目标蛋白抗体为单克隆抗体或多克隆抗体;

所述抗目标蛋白抗体具体为单克隆抗体;

所述传感芯片为CM5芯片;

所述目标蛋白为Cry1Ac蛋白。

9.根据权利要求7或8所述的生物传感器,其特征在于:

所述抗目标蛋白抗体为抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体;

所述Cry1Ac蛋白为如下(a)或(b)的蛋白质:

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;

(b)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列2衍生的蛋白质。

10.根据权利要求7-9中任一所述的生物传感器,其特征在于:

所述偶联包括如下步骤:将所述抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体的溶液流经活化后的CM5芯片,使其与CM5芯片表面结合,得到SPR生物传感器:

所述抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体的溶液为将抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体和pH为4.5、浓度为10mM NaAc水溶液混合,得到的溶液,所述抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体在所述单克隆抗体的溶液中的浓度为50μg/ml;

所述流经的流速为5μl/min;

所述流经的时间为3min;

所述生物为植物,所述植物具体为棉花。

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