[发明专利]一种检测植物中目标蛋白的方法及其专用SPR生物传感器有效
申请号: | 201110081230.1 | 申请日: | 2011-03-31 |
公开(公告)号: | CN102156193A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 麻密;徐文忠;赵卓亚;何振艳;申红玲 | 申请(专利权)人: | 中国科学院植物研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100093 北京市海淀区香*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 植物 目标 蛋白 方法 及其 专用 spr 生物 传感器 | ||
1.如下权利要求7-10中任一所述SPR生物传感器在辅助检测生物中目标蛋白中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述生物为植物;所述目标蛋白为抗虫蛋白。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:
所述植物为转入所述目标蛋白的编码基因的植物。
4.根据权利要求1-3中任一所述的应用,其特征在于:
所述抗虫蛋白为Cry1Ac蛋白。
5.根据权利要求1-4中任一所述的应用,其特征在于:
所述Cry1Ac蛋白为如下(a)或(b)的蛋白质:
(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列2衍生的蛋白质。
6.根据权利要求1-5中任一所述的应用,其特征在于:
所述Cry1Ac蛋白的编码基因为如下1)或2)或3)所示的基因:
1)序列表中序列1所示的DNA分子;
2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码具有相同功能蛋白的DNA分子;
3)与1)限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有相同功能蛋白的DNA分子。
7.一种用于辅助检测待测生物中目标蛋白的SPR生物传感器,为将抗目标蛋白抗体以共价结合的方式偶联到传感芯片上,得到SPR生物传感器。
8.根据权利要求7所述的生物传感器,其特征在于:
所述抗目标蛋白抗体为单克隆抗体或多克隆抗体;
所述抗目标蛋白抗体具体为单克隆抗体;
所述传感芯片为CM5芯片;
所述目标蛋白为Cry1Ac蛋白。
9.根据权利要求7或8所述的生物传感器,其特征在于:
所述抗目标蛋白抗体为抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体;
所述Cry1Ac蛋白为如下(a)或(b)的蛋白质:
(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)将序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列2衍生的蛋白质。
10.根据权利要求7-9中任一所述的生物传感器,其特征在于:
所述偶联包括如下步骤:将所述抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体的溶液流经活化后的CM5芯片,使其与CM5芯片表面结合,得到SPR生物传感器:
所述抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体的溶液为将抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体和pH为4.5、浓度为10mM NaAc水溶液混合,得到的溶液,所述抗Cry1Ac蛋白的单克隆抗体在所述单克隆抗体的溶液中的浓度为50μg/ml;
所述流经的流速为5μl/min;
所述流经的时间为3min;
所述生物为植物,所述植物具体为棉花。
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