[发明专利]一种用于严重脓毒血症及急性肝衰竭的检测试剂盒

权利要求书

1.一种用于严重脓毒血症及急性肝衰竭的检测试剂盒，其特征在于，包括但不限于以下组成：

红细胞裂解液、PBS溶液、CD45人单克隆抗体、CD14人单克隆抗体、CD16人单克隆抗体和1％多聚甲醛固定液。

2.按权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的CD45、CD14、CD16人单克隆抗体的浓度范围为0.00001μg/ml－100mg/ml。

3.按权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述的CD45、CD14、CD16人单克隆抗体的浓度为25μg/ml。

4.一种检测脓毒血症及急性/慢加急肝衰竭患者外周血单核细胞分化能力的方法，其特征在于，采用权利要求1的检测试剂盒，至少包括以下步骤：

（1）采集3ml 患者外周静脉血放入含枸橼酸钾的抗凝管内；

（2）取200微升上述全血种于外周血96孔板中的一孔，共6孔；

（3）置于37℃，5%CO₂的孵箱中孵育48小时；

（4）分别取0，12，24，32，36及48小时培养后的全血加入红细胞裂解液1ml；

（5）800g离心，弃上清；

（6）加入1xPBS洗涤后，再800g离心一次；

（7）加入2微升CD45、2微升CD14及3微升CD16人单克隆抗体孵育15－30分钟；

（8）离心，1xPBS洗涤一次；

（9）加入1％多聚甲醛固定；

（10）4⁰C保存，流式细胞仪上机检测，获得在CD45+ 范围内CD14^highCD16^- monoycte ，CD14^highCD16⁺monoycte分析结果流式图。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤（1）的采集外周静脉血的方式选自首次或后续或动态采集外周血。

6.按权利要求4所述的试剂盒的检测流程，其特征在于，所述步骤（10）的CD14^highCD16^- monoycte为Mo1, CD14^highCD16⁺monoycte 为Mo2。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的首次外周血检测单核细胞中M_O2/M_O1<1.0为分化阻抑。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的首次外周血检测单核细胞中M_O2/M_O1 > 1.0为分化成功。

9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的后续或动态检测外周血检测单核细胞中M_O2/M_O1<1.0为持续分化阻抑。

10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的后续或动态检测外周血单核细胞中M_O2/M_O1> 1.0为分化阻抑消失。

11.权利要求1的检测试剂盒在制备预测严重脓毒血症疾病的转归的制剂中的用途。

12.权利要求1的检测试剂盒在制备预测急性重症肝衰竭的转归的制剂中的用途。

13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，所述的急性重症肝衰竭包括急性肝衰竭、慢加急性肝衰竭以及亚急性肝衰竭。