[发明专利]洪山菜苔组织培养的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种洪山菜苔的组织培养方法，属于生物技术领域，具体地说是属于植物组织培养范畴。

背景技术

洪山菜苔，俗称红菜苔，又名“芸菜苔”。色紫红、花金黄，是武汉武昌洪山一带的特产。颜色紫红，脆嫩清香，营养丰富，常食不厌，是武汉人冬春两季的家常菜之一，同武昌鱼并称。据史籍记载，红菜苔在唐代是著名的蔬菜，历来是湖北地方向皇帝进贡的土特产，曾被封为“金殿玉菜”，与武昌鱼齐名。洪山菜苔即属于红油菜。种植此案需要肥沃的土壤，较低的气温，一般是秋植冬撷。

但是传统的洪山菜苔种植方法生长期长，所需人力物力成本都较高。

发明内容

本发明提供了一种快速、成本低、成活率高的人工繁育方法，即通过组织培养的方法获得可种植的洪山菜苔苗。

本发明的技术方案，其步骤为：

1、洪山菜苔组培材料：选择无病虫害、生长健壮的菜苔个体，将其切成条状，并使其带有部份根茎。

2、外植体灭菌处理：首先采用常规法，用洗衣粉溶液洗净，再用70％酒精浸泡30-60s，再用0.2％氯化汞浸泡10-15min，然后用无菌水冲洗3次。

3、愈伤组织及芽的诱导：在无菌条件下切取外植体，将其接种在诱导培养基上，培养基选用的MS培养基，补充6BA3-5mg/L，PH值为6-7，2周后芽开始萌动，4周后芽即长成一个新梢，7-8芽丛生。控制温度15℃，光照2000Lux。

4、增殖培养：将丛生芽在无菌操作的条件下转入继代增殖培养。增殖培养基采用MS培养基，补充6BA 5-7mg/L，NAA1-1.5mg/L，PH值为6-7，控制温度15℃、光照2000Lux。

5、生根培养：在无菌操作的条件下，将丛生芽从增殖培养基上转接到生根培养基上。生根培养基采用MS培养基，补充6BA 5-7mg/L，NAA1-1.5mg/L，IAA0.3-0.8mg/L，PH值为6-7，温度20℃；光照2000Lux，培养一周即生根。

本发明的有益效果是：利用组培技术快速繁殖洪山菜苔，人们再不受自然条件限制，利用组培苗进行集约化栽培，可以节约大量的物力、财力。

具体实施方式

实例一：

取生长健壮、无病虫害洪山苔菜，并带有部份根茎，先用清水洗净再用洗衣粉洗，洗后用自来水冲洗15min，在无菌的条件下切取休眠芽，用70％的酒精浸泡45s，再用0.2％升汞浸泡12min，浸泡后随即用无菌水冲洗3次，然后接种到备好的培养基上，进行诱导芽。

诱导芽使用的培养基为MS培养基，配制方法采用常规配制法。MS培养基中补充6BA5mg/l，PH值为6.5，温度15℃，光照2000lux。10天后芽开始萌动，25天长成新梢，丛生芽7-8个。

在无菌的条件下切取芽转接到增殖培养基上进行增殖培养。增殖培养基为MS培养基，其中补充6BA5mg/l，NAA1mg/l，配制采用常规配制法，PH值6.5，温度15℃，光照2000lux，约3周后芽开始分化，分化芽3个。4周后在无菌的条件下接种到生根培养基上。

生根培养基为MS培养基，其中补充6BA5mg/l，NAA1mg/l，IAA0.5mg/l，PH值为6.5，温度15℃，光照2000lux。7天后开始生根，速度较快。生根后30天揭开瓶盖，2天后取出瓶苗开始过渡栽培。

从瓶中取出幼苗浸泡在0.5％高锰酸钾溶液中10s，取出后栽到高温灭菌的珍珠岩中7天成活以后，再栽到配制营养土袋中，营养土的配制，沙壤土与珍珠岩的比例为3∶1。5天后正常生长成活率95％左右。