[发明专利]人膜联蛋白V变体及其表达、制备和应用

说明书

技术领域

本发明属基因工程生物技术领域，涉及一种膜联蛋白V变体和所述膜联蛋白V变体的试剂制备和药学用途。 

背景技术

膜联蛋白V(Annexin V)属于膜联蛋白家族，此家族是一组进化上高度保守的、具有Ca2+和磷脂结合特性的蛋白质。它们在结构上具有同源性，被认为是Ca2+调节的膜结合组件。膜联蛋白家族功能上的相同点在于：在Ca2+存在时，对酸性磷脂分子有高亲合力。人们在高等和低等真核生物中都发现存在有膜联蛋白家族的成员。膜联蛋白成员存在于很多不同的细胞类型中，它们的生化作用与免疫性质密切相关，参与抗凝、抗炎症过程，特别是细胞复制、分化及胞吐过程(Iwasaki A，Suda M，Nakao H，et al.Biochem，1987，10：1261；Pollard H B，Haigler HT.Biol Chem，1990，265：21207)。该家族成员的生物学功能还待进一步的研究。尽管人们对成员的体内功能仍不甚了解，但普遍认为：膜联蛋白与磷脂结合的活性是膜联蛋白家族体外活性的基础，并且与它们的生理性质紧密相关。 

目前，膜联蛋白V的应用主要集中在凋亡的检测。细胞凋亡(Apoptosis)又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death，PCD)，是细胞生命周期中的重要组成部分，是不同于坏死和意外死亡的由基因调控的细胞主动性死亡过程(Cohen JJ，Immunol Today，1993，14(3)：126-130)。细胞凋亡是生物体调节和维持机体相对平衡的重要方式，它也与多种疾病病理过程密切相关，在肿瘤的发生发展及放化疗、脑和心肌细胞缺血再灌注损伤和器官移植中的排斥反应等过程中，均可发现细胞凋亡现象及其变化。细胞凋亡是细胞主动参与的自身程序性死亡过程，涉及一系列生物分子及细胞形态学的改变，当细胞发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸(PS)会发生翻转而暴露在细胞膜外面(Fadok VA，Voelker DR，Campbell PA，Cohen JJ，Bratton DL，Henson PM.J Immunol，1992，148(7)：2207-2216)，是细胞凋亡早期事件，发生在凋亡细胞形态学改变之前(Narula J，Strauss HW，2003，J Nucl Med，44(3)：397-399)，也是凋亡级联反应的初始事件，作为凋亡细胞被吞噬细胞识别的标志，从而进一步引起胞浆的皱缩、染色质的浓集及核内DNA降解等。因此，外翻的PS是目前研究最多并最有希望和应用前景 的凋亡检测靶点，可早期检测凋亡，具有较高的时效性(Bold RJ，Termuhlen PM，McConkey DJ，Surg Oncol，1997，6(3)：133-142)，国内外常利用同PS特异性结合的药物来检测细胞凋亡。