[发明专利]红叶南天竹的组织培养方法

权利要求书

1.红叶南天竹的组织培养方法，其特征在于包括以下步骤：

1）从红叶南天竹实生苗中选取健康、观赏性状表现典型的植株作为材料；在晴天的上午，剪取新枝，去除羽状复叶，清洗备用；

2）在超净工作台上，将清洗干净的枝条依次用酒精溶液、升汞溶液浸泡消毒并冲洗；

3）剥出枝条内的茎尖，切下先端部分接入培养基中放在培养室中培养；

4）培养一段时间后，茎尖分化增殖形成若干不定芽，将不定芽转接入增殖培养基中培养；

5）培养一段时间后，将不定芽生长形成的嫩茎切下，经生根培养基培养后，形成健壮的组培生根苗。

2.如权利要求1所述的红叶南天竹的组织培养方法，其特征在于步骤1）中：采集新生枝条前一个月每隔7-10d整株喷洒700倍-900倍多菌灵；采集后的枝条，剪除羽状复叶，自来水冲洗干净，洗洁精溶液浸泡5-10min，再用自来水冲洗0.3-0.6h备用。

3.如权利要求1所述的红叶南天竹的组织培养方法，其特征在于步骤2）中：酒精浓度为70%-80%，浸泡时间为20-30s，倒掉酒精后无菌水冲洗4-5次，然后加入0.05%-0.2%升汞溶液，浸泡8-10 min，其间不断摇动，倒掉升汞溶液用无菌水冲洗7-8次。

4.如权利要求1所述的红叶南天竹的组织培养方法，其特征在于步骤3）中：枝条消毒后用无菌刀片剥取茎尖，切下先端长度为3-6mm的部分，接入配制好的诱导分化培养基中；诱导分化培养基的配方为MS培养基中添加0.5-1.5mg·L^-1 6-苄氨基嘌呤、0.05-0.15 mg·L^-1吲哚丁酸、2-5%蔗糖和0.5-0.8%琼脂制成，至培养基pH为5.8-6.0止。

5.如权利要求1所述的红叶南天竹的组织培养方法，其特征在于步骤4）中：培养室中培养温度为25±2℃，光照时间11-13h/d，光强1500-2000Lx；茎尖接入培养基60d-65d，茎尖分化形成新芽，并长出幼嫩枝条，将长于0.4-0.6 cm幼嫩枝条切割成0.5-1.0cm的茎段转接入增殖培养基，增殖培养基配方为MS培养基中添加0.5-1.5 mg·L^-1 6-苄氨基嘌呤、0.1-0.2 mg·L^-1吲哚丁酸、2-5%蔗糖和0.5-0.8%琼脂制成，至培养基pH为5.8-6.0止。

6.如权利要求1所述的红叶南天竹的组织培养方法，其特征在于步骤5）中：茎段在增殖培养基培养60d-65d，茎段增殖形成不定芽，并抽生出嫩茎，将茎段分化生长出的长度超过2-4 cm的嫩茎切下，接入生根培养基；生根培养基的配方为1/2MS培养基中添加0.1-0.5 mg·L^-1吲哚丁酸、0.05-0.15 mg·L^-1萘乙酸、1-3%的蔗糖、0.5-0.8%的琼脂和0.1-0.3 g·L^-1活性炭制成，至培养基pH为6.3-6.7止；培养后60-75d后，形成健壮的生根苗。