[发明专利]一种检测手足口病病原的纳米探针芯片及其应用方法

权利要求书

1.一种检测手足口病病原的纳米探针芯片，主要由分别包被有病原特异性检测分子的纳米荧光探针构成，所述纳米荧光探针包括以下纳米探针中一种或者几种：

不同荧光发射波长的水溶性量子点；

硅壳纳米荧光探针；

壳聚糖纳米荧光探针；

磁性纳米荧光探针；

所述特异性检测分子为以下分子中的至少一种：

EV71抗体或EV71抗原适配子序列；

EV抗体或EV抗原适配子序列；

CAV16抗体或CAV16抗原适配子序列；

针对EV 5’端非编码区、EV71 VP1区、CAV16特征核酸序列各区段基因中的DNA分子探针。

2.根据权利要求1所述的纳米探针芯片，其特征在于所述纳米荧光探针的荧光发射波长范围为300-1000nm。

3.根据权利要求1所述的纳米探针芯片，其特征在于所述EV71抗原的适配子序列为以下5’端经氨基修饰后适配子序列中的至少一种：

5’-NH₂-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TTCTATCGTTCCGGACGCTTATGCCTTGCCATCTAC-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’；

5’-NH₂-AmMC6-ATCCGTCACTCCTGCTCT-GTAGATGGCAAGGCATAAGCGTCCGGAACGATAGAA-TGGTGTTGGCTCCCGTAT-3’；

5’-NH₂-AmMC6-ATACGGGAGCCAACACCA-TGAATATCTCTTCTACCTCCTCTCCTCCCTTTACTT-AGAGCAGGTGTGACGGAT-3’。

4.一种检测手足口病病原的纳米探针芯片的应用方法，其特征在于包括以下步骤：第一步：通过筛选针对EV病原的抗体、多肽、适配子序列以及核酸引物序列，确定特异识别EV病原的特异检测分子；

第二步、对上述特异检测分子进行纳米荧光探针标记，得到纳米探针芯片；

第三步、将信号探针与待测病原分子进行化学偶联，得到信号探针-病原分子复合物；

第四步、将纳米探针芯片与信号探针-病原分子复合物混合反应；

第五步、将第四步中的反应产物通过荧光分光光度计或者荧光图谱扫描仪检测，根据纳米荧光探针荧光强度的变化诊断待测病原分子的浓度。

5.根据权利要求4所述检测手足口病病原的纳米探针芯片的应用方法，其特征在于所述信号探针为金属纳米粒子、金纳米粒子、BHQ-2、Cy3、Cy5分子中的一种或者几种，与待测病原分子进行化学交联，得到信号探针-病原分子复合物。