[发明专利]抑制肺转移肿瘤生长的siRNA及其寡聚核酸组合与应用

说明书

技术领域

本发明涉及抑制肺转移肿瘤生长的siRNA及其寡聚核酸组合与应用。

背景技术

微小核酸(miRNA)是一类高度保守的非编码小核酸，广泛存在于动物植物和病毒中。miRNA通过转录后调控基因的表达，进而调节机体重要的生理与病理过程。微小核酸与肿瘤的发生密切相关。近年来的研究发现，miRNA在肿瘤组织和与正常组织间的表达明显不同。miRNA既可以作为原癌基因促进肿瘤的发生发展，又能作为抑癌基因抑制肿瘤的发生发展，根据miRNA调节肿瘤发生发展的不同机理，将它们组成不同的配方或将它们与其它抗肿瘤的小干扰RNA(siRNA)组成不同的配方，将比单一的miRNA更能有效地治疗肿瘤性疾病。

发明内容

本发明的目的在于提供一种寡聚核酸在制备抑制肺转移肿瘤生长的试剂中的应用。

本发明所述的寡聚核酸是如下1)-4)中任一所述的双链RNA：

1)序列表中序列1和序列2组成的寡聚核酸；

2)所述1)的寡聚核酸与PTN-siRNA组成的双寡聚核酸，所述PTN-siRNA是序列表中序列3和序列4组成的寡聚核酸；

3)所述1)的寡聚核酸与miR-34a组成的双寡聚核酸，所述miR-34a是序列表中序列5和序列6组成的寡聚核酸；

4)所述1)的寡聚核酸与VEGF-siRNA组成的双寡聚核酸，所述VEGF-siRNA是序列表中序列7和序列8组成的寡聚核酸。

上述2)的双寡聚核酸中，所述1)的寡聚核酸与PTN-siRNA的质量比是(0.5-2)∶(0.5-2)，优选是1∶1。

上述3)的双寡聚核酸中，所述1)的寡聚核酸与miR-34a的质量比是(0.5-2)∶(0.5-2)，优选是1∶1。

上述4)的双寡聚核酸中，所述1)的寡聚核酸与VEGF-siRNA的质量比是(0.5-2)∶(0.5-2)，优选是1∶1。

进一步，上述1)-4)中的寡聚核酸均是经过如下a)或b)或c)修饰得到的寡聚核酸：

a)对所述寡聚核酸的连接核苷酸的磷酸二酯键进行修饰，优选将所述磷酸二酯键的氧用硫取代；

b)对所述寡聚核酸的核糖的2’-OH的修饰，优选将所述2’-OH用甲氧基或氟取代或者对所述2’-OH进行脱氧修饰；

c)对所述寡聚核酸5’端连上胆固醇的修饰。

上述序列表中序列1、3、5、7、9从左至右方向为5’-3’，序列表中序列2、4、6、8、10从左至右方向为3’-5’。

上述肿瘤是肠癌、鼻咽癌、宫颈癌、肝癌、乳腺癌或肺癌。

上述试剂可以包含上述寡聚核酸分子中的至少一种以及至少一种药学上可接受的载体。本文所用的“药学上可接受的载体”应当与本发明试剂中的双链RNA分子相容。在一个优选实施例中，所述“药学上可接受的载体”是指体内转染试剂，如聚乙烯亚胺(PEI)，jetPEI(线性聚乙烯亚胺)，TF-PEI(转铁蛋白聚乙烯亚胺)脂质体，转铁蛋白，叶酸等。

所述寡聚核酸为化学合成，可以进行2′氟代(2′-F)、2′甲氧基(2′-OMe)、硫代(PS)和2′脱氧(2′-deoxy)化学修饰，也可以在5’端连上胆固醇修饰。

用化学合成并修饰的上述寡聚核酸分子转染鼻咽癌细胞株CNE形成的肺转移瘤肿瘤细胞的实验结果表明miR-210、siPTN、miR-210+siVEGF、miR-34a+miR-210、miR-210+siPTN这几组均可以有效的抑制肺转移瘤的生长。

作为新型小核酸类的抗肿瘤药物，化学合成并修饰的所述寡聚核酸不易被降解，有较长的效应半衰期，能用于体外实验，更能用于体内治疗。

附图说明

图1为2′-F-siPTN及其寡聚核酸治疗抑制肺转移瘤形成的肺部压片效果图。

图2为2′-F-siPTN及其寡聚核酸组合治疗鼻炎癌肺转移6次以后肺部转移灶统计柱形图。

图3为2′-F-siPTN及其寡聚核酸组合治疗鼻炎癌肺转移组织切片图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。

下述实施例中，如无特殊说明，均为常规方法。

实施例1、寡聚核酸的制备