[发明专利]含6-羟基犬尿喹啉酸的银杏叶提取物

说明书

技术领域

本发明涉及天然植物提取物，具体涉及银杏叶(Ginkgo bilobaL.)的有效成分的提取物，尤其涉及一种含6-羟基犬尿喹啉酸6-hydroxykynurenic acid(6-HKA)的新一代银杏叶提取物。

背景技术

从银杏叶提取物研发改善血液循环的药物，至今已有40多年，从上世纪90年代起，中国对银杏叶提取物进行了研究，发展了它的应用范围，并为心血管疾病患者提供了能够明显改善心脏冠状动脉血液流量的药物，极大地缓解了冠心病心绞痛病人的痛苦，同时改善了生活质量。银杏叶提取物已广泛应用于药品和保健品。

随着对银杏叶研究的深入，在银杏叶中发现了新的有效成分，如6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)，有文献报道它是一种N-甲基门冬氨酸(NMDA)拮抗剂(陈仲良，殷梦龙等，世界药品信息，2-2001)属于神经免疫方面的有效成分，有缓解脑内缺氧的功能，其与银杏叶中另一有效成分白果内酯的协同作用，可望成为预防脑内营养不良，防止脑神经凋亡等神经免疫性疾患，并有用于治疗和改善早老性痴呆等神经损伤患者的认知缺陷的可能。

经过调研后发现，至今，国内外的银杏叶提取物的有效成分质量标准仅针银杏黄酮苷和银杏内酯设定含量指标，6-HKA还未被应用于银杏叶提取物的质量标准中。

现有的银杏叶提取方法是经水、乙醇或者丙酮作提取剂，继而采用水或乙醇沉淀、pH调节结合大孔树脂层析或者乙酸乙酯、2-丁酮、3-戊酮萃取并精制获得的。一般需要经过8-10步以上的技术工序才能得以完成。这样的制备过程，所获得的银杏叶提取物中基本流失了6-HKA成分。由于6-HKA是同时含酸性和碱性盐基性团的有机化合物，分子中的阴阳离子成盐性质决定了它的水溶性质，根据其类似氨基酸的性质推测，其只有在被充分游离后才有可能以最高效率被获取；又因6-HKA是一种有机成分，所以它在某些有机溶剂中应该具有很好的溶解度；再者就是6-HKA分子结构中的4位羟基在某些条件会转变成为4位羰基从而影响到对6-HKA的富集。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，提供新的含有6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)的银杏叶提取物。同时公开一种有利于节能环保、安全高效和简单经济的含6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)的银杏叶提取物制备方法。

本发明提供了一种含6-羟基犬尿喹啉酸的银杏叶提取物。6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)是一种既含酸性官能团又含碱性官能团的盐基性有机化合物(陈仲良，殷梦龙.银杏叶中抗老年痴呆的活性成分.世界药品信，2001，2(1))，经HPLC分析：本发明提供的银杏叶提取物中6-HKA的含量在3％～4.5％。

6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)的结构式如下：

本发明为获取6-HKA，并使制备银杏提取物的过程达到环保节能、安全高效、简单经济的目的。采用了反常规的制备路线设计，创造性地将用于萃取的溶剂直接用作提取。

本发明的另一目的是提供了上述含6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)的银杏叶提取物的制备方法，该方法包括下列步骤：

(1)银杏叶粉碎，用混合溶剂提取；

(2)提取液浓缩成浸膏(浓缩的浸膏含水分10～15％)；

(3)将浸膏用水加热捏溶，冷却捏溶物料；

(4)冷却的捏溶物料澄清处理得到澄清液；

(5)澄清液浓缩；

(6)浓缩液干燥得到含6-羟基犬尿喹啉酸的银杏叶提取物。

所述步骤(1)提取所用的银杏叶原料可以市售得到，优选GAP基地种植并烘干的银杏叶，其中银杏黄酮含量在0.8～1.2％；提取用的混合溶剂用量为银杏叶重量的8～12倍kg/kg，优选10倍kg/kg。

所述混合溶剂由溶剂a)、溶剂b)和溶剂c)组成，其中溶剂a)可以是乙酸乙酯、2-丁酮或3-戊酮，优选乙酸乙酯；溶剂b)可以是甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇，优选乙醇；溶剂c)可以是pH 6.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液或柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，优选磷酸盐缓冲液。所述混合溶剂a)、b)和c)各溶剂的用量为银杏叶重量的倍数依次为：a)7～11倍kg/kg，优选9倍kg/kg、b)0.5～1.5倍kg/kg，优选0.5倍kg/kg；c)0.5～1.5倍kg/kg，优选0.5倍kg/kg；提取方法可以是静态回流、搅拌动态回流或者超声波热提取，优选超声波热提取；提取2～3次，优选提取2次；提取时间每次1～2小时，优选提取2小时；使用超声波热提取的温度35～50℃，优选35℃，提取时间20～40分钟，优选35分钟。