[发明专利]一种运用高速逆流色谱从大蒜中分离制备甾体皂苷的方法

权利要求书

1.一种高速逆流色谱分离大蒜中下列1、2、3和4四个甾体皂苷的方法，其特征是：将大蒜甾体总皂苷利用高速逆流色谱联用蒸发光散射检测器，依据蒸发光散射检测器谱图分别收集含1、2、3和4的流分，其中高速逆流色谱的固定相和流动相由正丁醇、冰醋酸和醋酸铵水溶液混合后分层，上相作为固定相，下相作为流动相，

其中Gal为β-半乳糖，Glc为β-葡萄糖，Xyl为β-木糖。

2.权利要求1的方法，包括：

a.将高速逆流色谱仪与蒸发光散射检测器连接；

b.将正丁醇、冰醋酸和醋酸铵水溶液混合成混合溶剂；

c.将大蒜甾体总皂苷溶于b步骤的混合溶剂中；

d.取b步骤混合溶剂分层，上相作为固定相，下相作为流动相，将固定相和流动相先后泵入高速逆流色谱内，c步骤溶液经进样阀进入色谱柱；进样完毕后继续泵入流动相；

e.依据蒸发光散射检测器谱图分别收集分离物，浓缩，即得1、2、3和4四个甾体皂苷。

3.权利要求1或2的方法，其中b步骤中的醋酸铵水溶液浓度为5～15mM，正丁醇、冰醋酸和醋酸铵水溶液的体积比为3～5∶1∶4～6。

4.权利要求2的方法，其中c步骤中大蒜甾体总皂苷溶于混合溶剂后的浓度为10～20mg/mL。

5.权利要求1或2的方法，其中大蒜甾体总皂苷由下列方法制备：大蒜鳞茎粉碎，以70～100％乙醇水溶液或70～100％甲醇水溶液回流提取，减压浓缩后得大蒜皂苷粗提物；将大蒜皂苷粗提物以水溶解，上大孔吸附树脂，乙醇洗脱，减压浓缩至干，即得。

6.权利要求1或2的方法，其中高速逆流色谱仪流速范围为0.5～3mL/min，转速范围为600～1000rpm。