[发明专利]南瓜籽粕蛋白酶解制备低分子肽

说明书

技术领域：

本发明涉及双酶水解植物蛋白制备小肽的技术，其作用底物为脱脂南瓜籽粕。

背景技术：

我国具有丰富的南瓜籽资源，年产量约46万吨，一般我国习惯将南瓜籽直接食用或作为原料出口他国，市场缺乏相应高端产品。目前，对南瓜籽开发利用主要用于加工成香脆的烤焙食品，也有将其加工成饮料的报道以及利用南瓜籽制造生奶，很少有人开发利用榨油后的南瓜籽粕。南瓜籽粕经我方测定约含50％蛋白质，经文献报道有大量活性物质，但风味特别，一般当做饲料添加物低价出售。植物蛋白单酶水解率不高，采用切割位点互补的双酶水解率高，水解产物分子量分布均匀，更适合工业加工和食用，并可能具有其前体未有的功能。

发明内容：

本发明试图采用双酶水解法将低值的南瓜籽榨油副产物转化为小肽混合物，提高其附加值。

本发明的方案是：以水解度为考察指标，南瓜籽粕蛋白为底物，木瓜蛋白酶和AS1.398蛋白酶双酶为水解酶，由实验得出双酶水解的最佳工艺，并在最佳工艺条件下做水解时间与水解率之间的关系曲线图，确定最佳水解时间。

最佳水解工艺参数为：双酶质量比1∶1，加酶量19％，底物质量浓度35mg/mL，温度50℃，pH 7.0，水解时间5h。

本发明的优点在于：原料选择被视为工业废料的低值高蛋白-南瓜籽粕，酶解后其应用价值和加工性能、可食性大大增加；工具酶选择价格低廉、来源广泛而水解位点互补的木瓜蛋白酶和AS1.398中性蛋白酶；采用最佳水解工艺下观察水解率的方法，更精确的掌握较好的水解时间。

具体实施方式：

将脱脂南瓜籽粕粉碎，过100目筛，准确称取南瓜籽粕粉，加入适量水配制成一定质量浓度的南瓜籽粕蛋白溶液，初次称量总重，经100℃高温预处理10min后，加适量水调制到总重以保持南瓜籽粕蛋白液的质量浓度，调节温度至反应温度并搅拌2min，调节pH至反应pH，加入一定比例蛋白酶进行恒温酶解，并不断进行搅拌，同时滴加0.1mol/L的NaOH溶液以保持反应体系pH恒定，反应偏差一般控制在±0.11，达到反应预定时间后，将南瓜籽粕蛋白酶解液加热升温至100℃，保温10min使酶活力丧失。