[发明专利]一种汉防己乙素的提纯方法

说明书

技术领域：

本发明属于天然产物分离领域，尤其是涉及一种采用ODS反相硅胶法精制汉防己乙素的方法。

背景技术：

汉防己为防己科千金藤属植物粉防己Stephania tetrandra S.Moore的块根，是祛风湿、解热镇痛药物，主治水肿、小便不利、风湿关节疼痛、高血压病等。

汉防己含有生物碱、黄酮、多糖等多种成分，其有效成分为生物碱，总生物碱含量可达2.3％，其中汉防己甲素(tetrandrine)约1％，汉防己乙素(fangchinoline)约0.5％。现代药理研究表明汉防己生物碱具有镇痛、消炎、降压、抗菌、抗肿瘤、松驰横纹肌等作用。

汉防己乙素：别名防己诺林碱，去甲汉防己碱，防己醇灵等，双苄基异喹啉类生物碱。分子式：C₃₇H₄₀N₂O₆；分子量：608；物理性质：熔点237～238℃(丙酮)，熔点177～179℃(甲醇)。无色砂状结晶，熔点237～239℃，为脂溶性生物碱。结构式：

汉防己乙素是一种天然的钙拮抗剂，对多种疾病有显著的治疗效果，如具有广谱消炎抗菌作用，抗高血压、糖尿病、肝纤维化，对脑细胞具有保护作用。刘正等公开的“汉防己乙素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时脂质过氧化动态变化的影响”，该研究表明肝脏缺血再灌注损伤时脂质过氧化呈进行性加重的变化；汉防己乙素能抑制氧自由基的生成，增强对其的清除，具有较好的保护作用。

现有汉防己乙素的提取方法多是采用两次提取法。如专利“自粉防己提取的制备物及其用途”(公开号：CN1658890A)，该专利公开的方法是将粉防己先采用稀酸提取，水浸洗，合并酸液与浸洗液，调碱沉淀，再将沉淀物滤出干燥，加醇回流提取，提取液浓缩结晶，最后用热氨性乙醇重结晶。该方法仅制得汉防己甲素与汉防己乙素的混合物，未能将两者分离，且该溶剂消耗量大，能耗大。再如专利“一种汉防己甲素和乙素的制备方法”(专利号：CN1903856A)，该专利采用的方法是将原料混入生石灰后用极性有机溶剂回流提取，提取液回收溶剂，放置结晶，滤出结晶再用丙酮热回流提取，提取液浓缩，放置结晶，结晶用冷苯溶解，得不溶物为汉防己乙素粗品。该方法同样采用两次提取法，溶剂消耗量大，且制备过程中采用毒性有机溶剂苯，该方法仅制得汉防己乙素粗品。

发明内容：

本发明的目的是提供一种高含量的汉防己乙素的制备方法，该方法操作简便，能耗相对小，且制得的汉防己乙素较纯。

为了解决上述技术问题，本发明的目的是这样来实现的：

一种汉防己乙素的提纯方法，其特征在于包含以下步骤：

1)将汉防己药材粉末加5～12倍量的醇液回流或冷浸提取2～4次，每次提取1～3h，提取液回收溶剂至无醇味，加酸调至pH2～4，过滤得酸液；

2)将上述酸液调碱，加入1～3倍量的氯仿萃取，静置分层，放出氯仿层，与ODS硅胶拌样，挥干溶剂，上样，用甲醇-水或者乙腈-水混合溶剂洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥即得产品。

所述步骤1)中的醇液是指40～70％的乙醇或甲醇溶液，酸选用盐酸、硫酸或甲酸中的一种。

所述步骤2)中用于调碱的是氢氧化钠或氢氧化钾溶液，调节至pH9～11。

所述步骤2)中ODS硅胶用量是药材量的1/2～1(W/W)，洗脱溶剂为55～60％甲醇水溶液或者乙腈水溶液。

本方法积极效果是：

1)本方法采用ODS硅胶柱纯化，可得到高纯度的汉防己乙素，硅胶可重复利用；

2)本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取汉防己药材粉末1kg，加5L的40％甲醇液回流提取2次，每次提取1h，提取液回收溶剂至无醇味，加盐酸调至pH2，过滤得酸液，加氢氧化钠调节至pH9，加入1倍量的氯仿萃取，静置分层，放出氯仿层，再取450gODS硅胶装柱，另取50gODS硅胶与氯仿层拌样，挥干溶剂，上柱，用60％甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥即得产品3.8g，含量99.1％。

实施例2：