[发明专利]一种胸腺肽β4的分离纯化方法无效

专利信息
申请号: 201110028486.6 申请日: 2011-01-26
公开(公告)号: CN102167738A 公开(公告)日: 2011-08-31
发明(设计)人: 吴绵斌;张书衍 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C07K14/575 分类号: C07K14/575;C07K1/18
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 胡红娟
地址: 310027 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 胸腺肽 sub 分离 纯化 方法
【权利要求书】:

1.一种胸腺肽β4的分离纯化方法,包括:将动物胸腺置于高氯酸溶液中破碎,离心取上清液,调节pH后再次离心取上清液,第一次冻干;将第一冻干粉溶于pH值小于胸腺肽β4等电点的第一缓冲液,通过装填有阳离子交换剂的交换柱,第一次洗脱,收集洗脱液,第二次冻干,将第二冻干粉溶于pH值大于胸腺肽β4等电点的缓冲液中,通过装填有阴离子交换剂的交换柱,第二次洗脱,收集洗脱液,脱盐。

2.根据权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的高氯酸溶液浓度为0.2~1M。

3.根据权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的阳离子交换剂为CM-sepharose FastFlow凝胶。

4.根据权利要求3所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的第一次洗脱,收集洗脱液包括:

分别用质量体积浓度为1%、4%的NaCl溶液阶跃洗脱,收集利用质量体积浓度4%的NaCl溶液洗脱获得的洗脱液。

5.根据权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的阴离子交换剂为DEAE-sepharose FastFlow凝胶。

6.根据权利要求5所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的第一次洗脱,收集洗脱液包括:

分别用蒸馏水、质量体积浓度为1%、4%和5%的NaCl溶液阶跃洗脱,收集利用质量体积浓度4%的NaCl溶液洗脱获得的洗脱液。

7.根据权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的脱盐方法为凝胶过滤。

8.根据权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的第一缓冲液为pH值达2.5~4.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。

9.根据权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的第二缓冲液为pH值达6.5-7.1的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液。

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