[发明专利]蒜头果仁凝集素及其制备方法无效
| 申请号: | 201110025266.8 | 申请日: | 2011-01-24 |
| 公开(公告)号: | CN102174095A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
| 发明(设计)人: | 陈朝银;赵声兰;徐进;葛锋;刘迪秋;韩本勇;熊向峰 | 申请(专利权)人: | 昆明理工大学 |
| 主分类号: | C07K14/42 | 分类号: | C07K14/42;A61K38/16;A61P31/18;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/18 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 650093 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 蒜头 果仁 凝集素 及其 制备 方法 | ||
1.一种蒜头果仁凝集素,包括下列质量组分:
蛋白质 60~80%, 多糖 15~30%。
2.权利要求1所述的蒜头果仁凝集素用于兔、猪、鸡、鸭、鼠的红细胞凝集,抗HIV活性。
3.一种蒜头果仁凝集素的制备方法,经过下列各工艺步骤:
A.将干燥的蒜头果仁粉碎,按固液比为1︰3~8溶解于水中,水温为0~10℃,在0~10℃温度下搅拌10~48h,然后将此混合物进行过滤,得到黄色透明滤液;
B.向滤液中加入硫酸铵粉末,并搅拌溶解直至硫酸铵饱和度达25~40%时停止加入,在0~10℃下静置1~2小时后,于0~10℃、转速为1000~8000rpm下进行离心分离,取其上清液继续加入硫酸铵粉末至饱和度达60~75%,静置1~2小时后,于0~10℃、转速为1000~8000rpm下进行离心分离,去除上清液,取其沉淀物,即为凝集素粗品;
C.将步骤B所得凝集素粗品用蒸馏水溶解后进行超滤或透析除盐,得浓缩液;
D.将步骤C所得浓缩液经过离子交换层析,用0.02mol/L的Tris-HCl缓冲液挂柱,使样品吸附,用0.02mol/L的Tris-HCl缓冲液与浓度从0.1%NaCl线性逐渐升高到6%NaCl的盐溶液进行线性浓度梯度洗脱,用兔红细胞检测凝集活性,收集有凝集活性的组分,再经超滤或透析除盐、浓缩、冷冻干燥,即得蒜头果仁凝集素,其包括下列质量组分:蛋白质 60~80%,多糖 15~30%。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:所述步骤A中干燥的蒜头果仁粉碎粒度为40~200目。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法,其特征在于:所述步骤C和D中超滤或透析除盐的膜透过分子量≤10kd。
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