[发明专利]一种抗心肌肥大药物筛选模型及其构建和应用

权利要求书

1.一种抑制Ang II诱导MR-1基因表达上调的抗心肌肥大药物筛选模型，其特征是，所述模型系指转染了MR-1启动子一报告基因表达质粒的稳定表达心肌细胞株。

2.如权利要求1所述的筛选模型，其特征是，所说基因表达质粒为MR-1启动子与含报告基因表达质粒载体的连接产物。

3.如权利要求1所述的筛选模型，其特征是，所说心肌细胞选自大鼠可传代心肌细胞。

4.构建权利要求1所述筛选模型的方法，其主要步骤包括：

1)扩增MR-1基因转录起始位点启动子区域片段，通过酶切和连接克隆于报告基因表达质粒，获得重组质粒；

2)重组质粒的PCR、酶切和测序鉴定；

3)将鉴定过的重组质粒转染大鼠可传代心肌细胞，经加压筛选，获得稳定的转染细胞株。

5.权利要求1所述模型在筛选抗心肌肥大药物中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征是，培养稳定转染细胞株，在培养液中加入待筛选化合物，部分细胞培养液中再加入Ang II，诱导心肌肥大反应发生；清洗细胞，通过测定待筛化合物抑制报告基因表达程度，评估所述化合物抗心肌肥大的效果。