[发明专利]从有蓝藻爆发的水体中分离纯化噬藻体的方法无效
申请号: | 201110007183.6 | 申请日: | 2011-01-13 |
公开(公告)号: | CN102174482A | 公开(公告)日: | 2011-09-07 |
发明(设计)人: | 郭宗楼;黄朴;刘露;武海涛;徐立红 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N7/02 | 分类号: | C12N7/02;C12R1/92 |
代理公司: | 杭州之江专利事务所(普通合伙) 33216 | 代理人: | 连寿金 |
地址: | 310058 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蓝藻 爆发 水体 分离 纯化 噬藻体 方法 | ||
1.一种从有蓝藻爆发的水体中分离纯化噬藻体的方法,其特征在于采用如下步骤:
A)采集蓝藻爆发天然水域表层的水样,于冰浴条件下保存,水样依次通过孔径为0.80μm,0.45μm,0.22μm的微孔滤膜后,经超滤系统浓缩成浓缩水样,其浓缩倍数为200~1000倍;
B)配制浓缩水样与对数期的铜绿微囊藻液的混合液,在光照强度为2000lux,温度为30℃,光暗周期为12h∶12h条件下培养3~7天,得到铜绿微囊藻裂解液,当颜色变为透明时,判定水样中含有噬藻体;组成混合液的浓缩水样与对数期的铜绿微囊藻液的体积比为1∶9;
C)将上述铜绿微囊藻裂解液经0.22μm的微孔滤膜过滤,除去铜绿微囊藻裂解碎片,经超滤系统浓缩后,用CsCl密度梯度离心纯化噬藻体,吸取CsCl密度梯度中的病毒条带放在SM缓冲液中透析,此时得到的透析液即为噬藻体纯化液。
2.根据权利要求1所述的一种从有蓝藻爆发的水体中分离纯化噬藻体的方法,其特征在于:表层水样是指从蓝藻爆发天然水域表层深度不超过0.5米处采集的水样。
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