[发明专利]植物中果胶含量的连续流动测定方法有效
申请号: | 201110007109.4 | 申请日: | 2011-01-13 |
公开(公告)号: | CN102033051A | 公开(公告)日: | 2011-04-27 |
发明(设计)人: | 孔浩辉;程志颖;周瑢 | 申请(专利权)人: | 广东中烟工业有限责任公司 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N21/33;G01N21/78;G01N5/04;G01N1/44;G01N1/34 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 曹志霞;李赞坚 |
地址: | 510620 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 果胶 含量 连续 流动 测定 方法 | ||
技术领域
本发明涉及植物组分的提取,尤其涉及一种植物中果胶含量的连续流动测定方法。
背景技术
在植物中果胶含量的测定中,常需用到显色法检测,但在显色法检测时,由于色素会有一定吸光度,从而对显色法造成干扰,同时糖会与显色剂反应形成有色物质,这也会对显色法造成干扰,所以在测定过程中,通常都需要先进行除糖、除色素的前处理。在植物中果胶含量的测定中,常用的样品前处理方法是:将植物粉末样品用浓度为80%的乙醇溶液加热回流1小时,去除滤液,余下滤渣再做进一步的提取处理,用于其它检测,此种方法一般称为乙醇处理法,但这种乙醇处理法存在的问题是:只能除去小分子水溶性糖,同时对色素的提取也有一定局限性。而在滤渣处理时,有时候需要用酸液提取,这就造成之前来被提取出来的多糖水解而被提取出来,而由于酸的作用破坏了细胞壁,使之前来能溶解出来的色素也被提取出来,从而影响最终检测结果。在进行完前处理后,要对经过前处理的样品进行检测。现有的检测方法有重量法,由于果胶不是单纯半乳糖醛酸的聚合,在采用重量法检测时,支链上的中性糖和α-L-(1→2)鼠李糖,以及甲酯化基团、乙酰化基团同时被沉淀下来,所以其重量必然高于对半乳糖醛酸累计量。因此,重量法检测结果无法反映出样品中半乳糖醛酸的含量情况,即无法反映出样品中表征果胶特性的半乳糖醛酸支链骨架的含量情况。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术存在的缺陷,提供一种植物中果胶含量的连续流动测定方法,检测结果更加准确。
本发明提供的一种植物中果胶含量的连续流动测定方法,包括如下步骤:
1)将植物样品加入前处理液中,在水浴中加热回流;
2)然后进行初次过滤,将初次过滤的滤渣用酸醇溶液冲洗;
3)再将冲洗后的滤渣加入到氢离子浓度为1.5mol/L~2.5mol/L的提取液中,在水浴中加热回流;
4)然后进行二次过滤,将二次过滤后的滤渣用酸溶液冲洗多次,随后将二次过滤后的滤液与冲洗液合并、定容,得到待检测液;
5)将待检测液吸入到连续流动分析仪中,所述待检测液与吸入到连续流动分析仪中的强酸性分解试剂反应,分解成糠醛碱的衍生物,而后与加入的显色剂反应显色,在490nm~540nm波长下进行检测;
其中,所述前处理液为酸醇溶液,所述酸醇溶液的氢离子浓度为0.005mol/L~0.05mol/L,以体积百分比计,所述酸醇溶液的醇浓度为60%~80%。
优选地,所述酸醇溶液选用盐酸或醋酸制成。
优选地,所述酸醇溶液选用乙醇、异丙醇、甲醇中的任一种制成。
优选地,所述提取液为氢离子浓度为1.5mol/L~2.5mol/L的盐酸溶液。
优选地,步骤1)中,在80℃~100℃的水浴中加热回流10min~60min。
优选地,步骤3)中,在80℃~100℃的水浴中加热回流1h~3h。
优选地,所述初次过滤、二次过滤均采用玻璃纤维滤片、活性炭纤维滤片、聚乙烯滤片、不锈钢烧结滤片、陶瓷烧结坩埚、玻璃烧结坩埚中的任一种进行过滤。
优选地,步骤5)中将待检测液与强酸性分解试剂通过螺旋管混合,在待检测液与强酸性分解试剂反应过程中加热,而后冷却。
优选地,所述植物样品为粉末状。
优选地,步骤1)中,所述植物样品体积较大时,加入前处理液后先搅拌成浆,再进行水浴加热回流。
优选地,所述显色剂为对羟基联苯溶液,所述对羟基联苯溶液中的各组分配比为:1000mL蒸馏水中溶解300mg~500mg对羟基联苯及3g~5g氢氢化钠。
优选地,所述强酸性分解试剂为含有四硼酸钠的浓硫酸溶液,其中,四硼酸钠与浓硫酸的配比为:1000mL浓度为92%~99%的浓硫酸中溶解3g~6g的四硼酸钠。
优选地,在待检测液与强酸性分解试剂反应过程中加热的温度为90℃~99℃。
优选地,冷却采用匝数为20匝~50匝的冷却管冷却。
与现有技术相比,本发明具有如下优点:
一、由于采用酸醇溶液作为前处理液对植物样品进行处理,再用氢离子浓度为1.5~2.5mol/L的提取液进行提取,从而得到待检测液,因此,具有如下优点:
1、由于前处理液含有醇,醇可以有效提取植物样品中的糖和色素,并可以沉淀果胶;
2、由于前处理液含有酸,在酸性条件下,使植物样品中部分多糖水解成低分子糖,一并被提取出来,避免多糖在其后酸解时水解释放出来而干扰样品的显色检测;
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