[发明专利]一种玉米肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物蛋白质组合物的制备方法，尤其涉及一种玉米肽的制备方法。

背景技术

肽是由氨基酸通过肽键连接而成的化合物，它是机体组织细胞的基本组成成分。最简单的肽是由两个氨基酸组成的二肽，其中含有1个肽键；含有3个、4个、5个等氨基酸的肽分别称为三肽、四肽、五肽等。由2个到10个氨基酸通过肽键形成的直键肽称为寡肽或小肽；由肽键结合起来的多于10个氨基酸的聚合体则称为多肽。科学家已在人体中发现了100多种生物活性肽，这些肽具有传递生理信息，调节生理功能的作用，对于人体的神经、消化、生殖、生长、运动、代谢、循环等系统的正常生理活动的维持非常重要，所有疾病的发生、发展、治疗、康复都与多肽有关系。

随着科学技术的不断发展，玉米蛋白作为饲料远远不能满足淀粉工业对副产品玉米蛋白粉处理的要求。在世界蛋白质资源严重缺乏的情况下，深入开发玉米蛋白粉的高附加值产品，以提高企业的经济效益，提高玉米资源的综合利用率，具有重要的现实意义。玉米肽是玉米蛋白经酶解后的产物，是小分子肽类混合物。玉米肽改善了玉米蛋白粉和玉米醇溶蛋白的水不溶性，具有溶解性好、酸性条件下不易凝聚、等电点不易沉淀、乳化性和起泡性强以及稳定性好等特点，易于作为功能因子添加到各种食品中。玉米肽还具有的许多生理活性，如可以利用其易消化吸收性、促进微生物发酵、抗氧化活性作为生产酸奶、酱油等食品的添加剂；可以利用其抗疲劳、促进乙醇代谢等活性，开发成运动饮料、醒酒产品等。

玉米蛋白粉(CGM，俗称玉米渣，又称玉米黄粉)，大约含有60％的蛋白质，其中玉米醇溶蛋白约占68％。由于玉米蛋白粉中含有高比例的谷氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、丙氨酸等疏水性氨基酸，很少含有赖氨酸等碱性氨基酸，这种独特的氨基酸组成使玉米蛋白水溶性差，但是能溶于70％～95％的乙醇。

目前，国内生产玉米肽的主要方法是以玉米蛋白粉为原料，采用单一蛋白酶在水相中进行酶解。该方法的主要不足在于玉米蛋白中的醇溶蛋白组分不能溶解于水中，蛋白酶不能对醇溶蛋白进行酶解，大部分的玉米蛋白没有酶解，浪费了宝贵的蛋白资源。另外，由于在酶解过程中要维持蛋白酶在最适的pH条件，需不断加入酸性或碱性试剂来调节pH值，而传统工艺中没有脱盐处理，使水解液总存在大量盐分，影响了玉米肽的质量，因此，需要对水解液进行脱盐处理。玉米蛋白水解液中，还有一部分的玉米蛋白大分子物质没有酶解，或者由于酶解不充分，有较大的多肽分子存在，因此，为了保证玉米肽分子量在一定范围内，需要对玉米肽粗品进行分级。因此，该方法不是有效生产玉米肽的方法。

发明内容

本发明的目的是为了提供一种玉米肽的制备方法。

本发明的玉米肽的制备方法包括如下步骤：

(A)取玉米蛋白粉按固液比1∶20至1∶60加入至65％～90％的乙醇溶液，搅拌，加热溶液至35～55℃，用NaOH溶液调节pH至8.0～11.0，按E/S比(酶用量：玉米醇溶蛋白)为6％～12％添加碱性蛋白酶，按此条件下在醇相中水解2～5h，酶解过程中用NaOH溶液保持pH值在8.0～11.0；

(B)步骤(A)结束后，蒸发出部分乙醇溶液，加水补齐至原水解液的体积，搅拌均匀，加热溶液至45～65℃，用NaOH溶液调节pH至8.0～11.0，按E/S比(酶用量：玉米醇溶蛋白)为2％～10％添加复合酶(碱性蛋白酶∶中性蛋白酶＝1∶1)，按此条件下在醇相中水解10～60min，酶解过程中用NaOH溶液保持pH值在8.0～11.0；

(C)步骤(B)结束后，用HCl溶液调节pH至5.0～3.0，3000～5000rpm，离心15～30min，得上清液，为玉米肽粗制液；

(D)将步骤(C)中的玉米肽粗制液注入储槽中，溶液经微滤后通过分子量截留量为3000Da超滤膜，溶液中的小分子物质经中空纤维膜的内壁渗透出来成为超滤液，收集超滤液，为玉米肽超滤液；溶液中的蛋白等大分子物质得以保留并得到浓缩，将浓缩液回收至步骤(B)进行二次酶解；

(E)交换树脂于去离子水中浸泡处理24小时后装柱，然后分别用7.5％盐酸和10％NaOH对其进行浸泡，转化为H⁺型阳离子交换树脂和OH^-型阴离子交换树脂，再用去离子水清洗至pH为7.0待用；