[发明专利]一种简便快速鉴别甘蓝型油菜小孢子再生的单倍体的方法

权利要求书

1.一种早期快速鉴定甘蓝型油菜小孢子试管苗单倍体的方法，其特征在于，它包含下列步骤：

1)在无菌条件下取离体培养获得的甘蓝型油菜小孢子试管苗基部往上的第5片平展叶，用刀片切取叶片中间组织，置于载玻片上，然后用镊子将其上表皮和叶肉细胞轻轻夹碎去掉，仅留下表皮组织，向所述的下表皮组织加一滴染色液，盖上盖玻片，染色2min，每片叶制成一张玻片，得到鉴定用的玻片；

2)将步骤1)的鉴定用的玻片置于光学显微镜的载物台上，用16倍目镜和40倍物镜头观察气孔保卫细胞中的叶绿体，每张鉴定用的玻片记录10个气孔的叶绿体数，即每株观察一片叶，每片叶统计10个气孔的叶绿体数；

3)根据步骤2所得叶绿体参数鉴定试管苗植株群体中的单倍体，双单倍体和四倍体；染色液的配制方法如下所示：

将0.5g的碘倒入小烧杯中，加40ml蒸馏水进行溶解，溶解后再加入碘化钾1.0g；用蒸馏水定容至50ml。