[发明专利]红豆杉免疫佐剂及含有该佐剂的流感疫苗

说明书

技术领域

    本发明涉及一种红豆杉免疫佐剂，还涉及含有该红豆杉免疫佐剂的流感疫苗，属于生物技术领域。

技术背景

曼迪亚红豆杉（Taxus madia）属于红豆杉中的一个天然杂交品种，其母本为东北红豆杉（T.cuspidata），父本为欧洲红豆杉（T.bauata），在美国、加拿大生长已有近100年的历史。我国20世纪90年代中期从加拿大引种，进行人工繁殖，在四川、广西、山东和云南等地栽培。

红豆杉（Taxus mairei）是第四纪冰川时期孑遗植物，世界珍稀濒危物种，在全世界共有十一种，目前我国共有四个种和一个变种，即云南红豆杉、西藏红豆杉、东北红豆杉、中国红豆杉和南方红豆杉（变种）。

曼迪亚红豆杉为人工栽培的常绿灌木，生物量十分巨大，生长时间短，主根不明显，侧根发达，枝叶茂盛，萌发力强，能耐－25℃的低温，生长快。中国大部分地区均可栽种。曼迪亚红豆杉通过人工选育已发展到10多个品系，其中，Taxus media是美国FDA批准可以用作提取“紫杉醇”的红豆杉之一，年生长实测40～50cm，最高可60～70cm，5年生可产原料1.5kg以上，次年萌生新枝叶，生物量还大于头年采收量。目前主要作为提炼“紫杉醇”的原料使用。

佐剂是一类能增强抗原免疫原性，提高疫苗效果的物质，正因为有了佐剂技术，使国产疫苗在价格上具有明显优势。在流感疫苗中使用佐剂不仅可以增强免疫原性，还可以降低抗原用量。特别在应对大流行流感时，使用佐剂降低抗原用量进而扩大接种人群数量的特性显得尤为重要。在大流行流感疫苗研究中应用到的佐剂主要有：铝佐剂(氧化铝、氢氧化铝、磷酸铝)、MF59(是一种水包油的乳剂,包含1%鲨烯, 0. 5%Tween80和0. 5%三油酸聚山梨脂的水包油乳液)、LTK63和新型佐剂等。

目前上市流感疫苗使用的佐剂主要是铝佐剂和MF59。但事实上铝佐剂对蛋白亚单位疫苗诱导抗体产生的能力较弱，不能有效地诱导免疫应答，在一些情况下还可产生与超敏反应有关的IgE。而MF59作为佐剂使用在增强免疫原性的同时，也增强了反应原性，如在接种部位红、肿、热、痛等症状增加。此外，由于安全性，副作用等问题，LTK63和新型佐剂等其他物质，包括壳聚糖、ISCOMs等，作为流感疫苗佐剂也还只限于研究阶段。因此，随着各种新发流感在世界的爆发和对人感染性的增强,，加快新型流感疫苗的研究，寻求更高安全性和免疫原性的佐剂，仍然是流感疫苗发展的一个需要。

佐剂发挥作用是由于能增强抗原的免疫原性，提高疫苗效果，因此佐剂一般可在多种疫苗中进行使用，如目前的铝佐剂。所以佐剂的研究不仅对流感，而且对其它感染性疾病的防治也有很高的价值。

流行性感冒（简称流感）是指由流感病毒引起，具有高度传染性的急性呼吸道传染病。流感发病快，传染性强，发病率高，主要通过空气飞沫传播。流感的流行没有明显的季节性,只是冬末春初发病率稍高一点，而且几乎每年都会发生,或者局部爆发,或者大规模流行，甚至造成世界规模的大流行，严重危害了人类的健康和生命，给社会造成了沉重的负担。到目前为止，接种流感疫苗被认为是预防流感发生与传播的最佳方法。由于流感病毒变异很快，通常每年的流行类型都有所不同，生产企业一般都在世界卫生组织（WHO）指导下选择流感病毒毒株进行疫苗生产，每年接种最新的流感疫苗才能达到预防的效果。一旦流感病毒变异造成大规模流行或者世界性流行，疫苗需求量会大量增加，但由于目前流感疫苗生产工艺的限制，短时间内不可能提供足量疫苗，所以，应用免疫佐剂，减少疫苗用量并提高其效果就显得非常重要。

经系统查阅文献和专利，目前未发现关于红豆杉提取物具有免疫佐剂作用的报道。

发明内容

为解决目前免疫佐剂单一，副作用难以避免，疫苗生产供应量有限，难以应付感染性疾病暴发时疫苗需求量大，疫苗起效时间慢等问题，本发明提供一种能提高疫苗免疫效果，同时带来巨大的经济效益和社会效益的红豆杉免疫佐剂。

本发明的另一个目的在于提供一种含有红豆杉免疫佐剂的流感疫苗。

本发明提供的红豆杉免疫佐剂是由下列质量比的组分组成的：

曼迪亚红豆杉提取物    0.001～100%

载体                  0～99.999%。

所述载体由下列质量比的组分组成：

乳化剂                                   20～70%

助乳化剂                                20～70%