[发明专利]具有葡糖淀粉酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸有效
| 申请号: | 201080071075.9 | 申请日: | 2010-11-30 |
| 公开(公告)号: | CN103298359A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
| 发明(设计)人: | S.兰德维克;绫部圭;G.科瓦德凯利 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司;诺维信北美公司 |
| 主分类号: | A23L1/09 | 分类号: | A23L1/09;C12N9/30;C12N9/34;C12N15/82;C12P7/06;C12P19/14;C12N5/14 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 史悦 |
| 地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 丹麦;DK |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 葡糖 淀粉酶 活性 多肽 编码 多核苷酸 | ||
1.一种具有葡糖淀粉酶活性的分离的多肽,其选自下组:
(a)多肽,其包含氨基酸序列,所述氨基酸序列与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有优选至少72%,更优选至少73%,更优选至少74%,更优选至少75%,更优选至少76%,更优选至少77%,更优选至少78%,更优选至少79%,更优选至少80%,更优选至少81%,更优选至少82%,更优选至少83%,更优选至少84%,更优选至少85%,更优选至少86%,更优选至少87%,更优选至少88%,更优选至少89%,更优选至少90%,更优选至少91%,更优选至少92%,甚至更优选至少93%,最优选至少94%,并且甚至最优选至少95%,如至少95%,至少97%,至少98%,至少99%或甚至100%同一性;
(b)多肽,其包含氨基酸序列,所述氨基酸序列与SEQ ID NO:2的氨基酸21至472所示的催化域具有优选至少72%,更优选至少73%,更优选至少74%,更优选至少75%,更优选至少76%,更优选至少77%,更优选至少78%,更优选至少79%,更优选至少80%,更优选至少81%,更优选至少82%,更优选至少83%,更优选至少84%,更优选至少85%,更优选至少86%,更优选至少87%,更优选至少88%,更优选至少89%,更优选至少90%,更优选至少91%,更优选至少92%,甚至更优选至少93%,最优选至少94%,并且甚至最优选至少95%,如至少95%,至少97%,至少98%,至少99%或甚至100%同一性;
(c)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸在优选至少中-高严格条件下,和最优选至少高严格条件下与以下杂交:(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列,(ii)包含于SEQ ID NO:1的cDNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链;
(d)多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸包含核苷酸序列,所述核苷酸序列与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有优选至少72%,更优选至少73%,更优选至少74%,更优选至少75%,更优选至少76%,更优选至少77%,更优选至少78%,更优选至少79%,更优选至少80%,更优选至少81%,更优选至少82%,更优选至少83%,更优选至少84%,更优选至少85%,更优选至少86%,更优选至少87%,更优选至少88%,更优选至少89%,更优选至少90%,更优选至少91%,更优选至少92%,甚至更优选至少93%,最优选至少94%,并且甚至最优选至少95%,如至少95%,至少97%,至少98%,至少99%或甚至100%同一性;和
(e)SEQ ID NO:2的成熟多肽的包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的变体。
2.权利要求1的多肽,其由多核苷酸编码,所述多核苷酸包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列,或其编码具有葡糖淀粉酶活性的片段的亚序列;或由SEQ ID NO:1的核苷酸序列,或其编码具有葡糖淀粉酶活性的片段的亚序列组成。
3.权利要求1或2的多肽,其中所述成熟多肽是SEQ ID NO:2的氨基酸20至573。
4.一种具有糖结合活性的分离的多肽,其包含糖结合模块,所述模块与SEQ ID NO:2的氨基酸480至573所示的糖结合域具有至少80%,更优选至少81%,更优选至少82%,更优选至少83%,更优选至少84%,更优选至少85%,更优选至少86%,更优选至少87%,更优选至少88%,更优选至少89%,更优选至少90%,更优选至少91%,更优选至少92%,甚至更优选至少93%,最优选至少94%,并且甚至最优选至少95%,如至少95%,至少97%,至少98%,至少99%或甚至100%同一性。
5.一种杂合酶,其包含催化域和权利要求4的糖结合域。
6.权利要求5的杂合酶,其中所述催化域具有选自下组的酶活性:α-淀粉酶,淀粉普鲁兰酶,β-淀粉酶,CGT酶,葡糖淀粉酶,异淀粉酶,产麦芽糖淀粉酶和普鲁兰酶。
7.一种分离的多核苷酸,其包含编码权利要求1-6任一项的多肽的核苷酸序列。
8.一种核酸构建体,其包含可操作连接的权利要求7的多核苷酸和指导所述多肽在表达宿主中产生的一种或多种(几种)调控序列。
9.一种重组表达载体,其包含权利要求8的核酸构建体。
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