[发明专利]用于制备T细胞受体样单克隆抗体的方法及其用途

权利要求书

1.一种制备T细胞受体样抗体的方法，所述方法包括以下步骤：

形成包含单体MHC-肽复合体的免疫原；

将有效量的所述免疫原施用于宿主以引起针对所述MHC-肽复合体中的肽的免疫应答；

选择对于所述MHC-肽复合体中的肽特异性的B细胞；

通过将所述B细胞与永生化细胞融合而形成杂交瘤；以及

分离由所述杂交瘤产生的抗体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述选择B细胞的步骤进一步包括以下步骤：

将对于所述MHC-肽复合体中的肽特异性的B细胞与生物素化的MHC-肽复合体一起孵育，其中所述MHC-肽复合体能够结合所述B细胞；以及

将所述生物素化的MHC-肽复合体与抗生物素偶联珠结合。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，作为结合常数(K_aff)测量的，所述抗体以至少1×10¹⁰升/摩尔的亲和力结合所述MHC-肽复合体中的肽。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体由ATCC保藏号PTA-10351的杂交瘤细胞系产生。

5.一种分离的抗体或其片段，其根据权利要求1所述的方法制备。

6.根据权利要求5所述的抗体，其中，作为结合常数(K_aff)测量的，所述抗体以至少1×10¹⁰升/摩尔的亲和力结合所述MHC-肽复合体中的肽。

7.根据权利要求5所述的抗体，其中所述抗体选自：

由ATCC保藏号PTA-10351的杂交瘤细胞系产生的抗体；

具有由ATCC保藏号PTA-10351的杂交瘤细胞系产生的抗体的结合特性的抗体；

结合能够与由ATCC保藏号PTA-10351的杂交瘤细胞系产生的抗体相结合的表位的抗体；

与包含SEQ ID NO：7、其变体、突变体或片段的氨基酸序列的表位相结合的抗体；以及

包含至少一条轻链和至少一条重链的抗体，其中所述轻链包含选自SEQ ID NO：1至3、其变体、突变体或片段的氨基酸序列，并且所述重链包含选自SEQ ID NO：4至6、其变体、突变体或片段的氨基酸序列。

8.根据权利要求5所述的抗体，其中所述肽是源自EBV的肽。

9.根据权利要求5所述的抗体，其中所述源自EBV的肽是LMP-1、其变体、突变体或片段。

10.根据权利要求5所述的抗体，其中所述肽包含SEQ ID NO：7。

11.根据权利要求5所述的抗体，其中所述抗体是人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

12.根据权利要求5所述的抗体，其中所述抗体以放射性核素标记。

13.根据权利要求5所述的抗体，其中所述抗体以毒素和/或化学治疗试剂标记。

14.一种制备杂交瘤的方法，所述方法包括以下步骤：

形成包含单体MHC-肽复合体的免疫原；

将有效量的所述免疫原施用于宿主以引起针对所述MHC-肽复合体中的肽的免疫应答；

选择对于所述MHC-肽复合体中的肽特异性的B细胞；

通过将所述B细胞与永生化细胞融合而形成杂交瘤；以及

分离所述杂交瘤。

15.根据权利要求14所述的方法，其中选择B细胞的步骤进一步包括以下步骤：

将对于所述MHC-肽复合体中的肽特异性的B细胞与生物素化的MHC-肽复合体一起孵育，其中所述MHC-肽复合体能够结合所述B细胞；以及

使用抗生物素偶联珠结合所述生物素化的MHC-肽复合体。

16.一种具有ATCC保藏号PTA-10351的杂交瘤细胞系。

17.一种在受试者中检测至少一种EBV感染的细胞的存在的方法，所述方法包括：

将根据权利要求5所述的抗体或其片段与获自受试者的样品接触；以及

检测所述抗体与所述EBV感染的细胞的结合。

18.一种治疗EBV关联疾病的方法，所述方法包括将根据权利要求5所述的抗体或其片段施用于需要的受试者。