[发明专利]用于诊断和筛选与HPV有关的癌症的高通量细胞基HPV免疫测定

权利要求书

1.量化临床样品中HPV蛋白质表达的方法，包括如下步骤：

获得临床样品，所述临床样品包括易受HPV感染细胞群体；

将所述临床样品沉积到基质中；

使所述临床样品与特异性结合由HPV感染细胞表达的HPV蛋白质的初次抗体接触，所述接触的条件是促进所述初次抗体与由来自所述获得的临床样品的所述细胞群体表达的HPV蛋白质特异性结合；和

量化所述初次抗体的所述特异性结合，从而量化所述临床样品中的HPV蛋白质表达。

2.权利要求1所述的方法，其中所述临床样品包括分散在收集液体中的细胞。

3.权利要求1所述的方法，还包括测量所述临床样品的细胞密度。

4.权利要求3所述的方法，还包括标准化所述临床样品的所述细胞密度。

5.权利要求1所述的方法，其中所述基质选自膜、珠和微量孔表面。

6.权利要求1所述的方法，还包括将所述量化的HPV蛋白质表达与预定的HPV蛋白质表达水平阈值比较。

7.权利要求6所述的方法，还包括根据所述临床样品中存在的细胞数目来标准化所述量化的HPV蛋白质表达。

8.权利要求6所述的方法，还包括将所述量化的HPV蛋白质表达与HPV蛋白质标准曲线比较。

9.权利要求6所述的方法，其中所述预定的HPV蛋白质表达水平阈值与所述临床样品中的癌症有关。

10.权利要求6所述的方法，其中所述预定的HPV蛋白质表达水平阈值与所述临床样品中的疾病等级有关。

11.权利要求10所述的方法，其中所述预定的HPV蛋白质表达水平阈值通过测量包含诊断的疾病等级的临床样品中的所述HPV蛋白质表达水平而被确定。

12.权利要求2所述的方法，其中所述临床样品包括固定的细胞。

13.权利要求2所述的方法，其中所述细胞获自宫颈拭子或宫颈刮片。

14.权利要求2所述的方法，其中所述细胞获自口腔拭子、口腔刮片、肛门拭子或肛门刮片。

15.权利要求1所述的方法，其中所述初次抗体特异地结合由一种或多种HPV编码的一种或多种HPV蛋白质，所述一种或多种HPV选自高风险HPV型、低风险HPV型、HPV-16、HPV-18、HPV-31、HPV-33、HPV-35、HPV-39、HPV-45、HPV-51、HPV-52、HPV-56、HPV-58、HPV-59和HPV-68、HPV-6、HPV-11、HPV-42、HPV-43、HPV-44、HPV-53、HPV-54、HPV-55和HPV-56。

16.权利要求15所述的方法，其中所述初次抗体特异地结合HPV蛋白质，所述HPV蛋白质选自HPV E6蛋白质、HPV E7蛋白质、HPV L1蛋白质和HPV L2蛋白质。

17.权利要求1所述的方法，其中所述HPV蛋白质包括选自下列的HPV蛋白质：HPV E6蛋白质、HPV E7蛋白质、HPV L1蛋白质和HPV L2蛋白质。

18.权利要求1所述的方法，其中所述基质是微量孔表面。

19.权利要求1所述的方法，还包括使所述临床样品与标记的二次抗体接触，所述标记的二次抗体特异地结合所述初次抗体。

20.权利要求19所述的方法，其中所述标记选自直接标记和间接标记。

21.权利要求1所述的方法，其中所述初次抗体包括标记。

22.权利要求21所述的方法，其中所述标记选自直接标记和间接标记。

23.权利要求1所述的方法，其中所述量化步骤包括量化由酶标记产生的生色基质。

24.权利要求1所述的方法，其中所述量化步骤包括量化荧光信号。

25.权利要求1所述的方法，还包括根据所述量化的HPV蛋白质表达评估所述临床样品中的HPV相关癌症疾病等级。

26.权利要求25所述的方法，其中所述HPV相关癌症是宫颈癌。