[发明专利]海藻细胞核基因组的同源组合无效
| 申请号: | 201080058106.7 | 申请日: | 2010-10-19 |
| 公开(公告)号: | CN102858980A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
| 发明(设计)人: | O·基利安;B·维克 | 申请(专利权)人: | 奥罗拉藻类股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12P19/34 |
| 代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 余颖 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 海藻 细胞核 基因组 同源 组合 | ||
1.一种把脱氧核糖核酸(DNA)引入海藻细胞细胞核的转化方法,该方法包括:
制备转化结构,该结构具有与相应第一细胞核DNA序列相似的第一DNA序列,与相应第二细胞核DNA序列相似的第二DNA序列,和在该转化结构中第一和第二DNA序列之间插入的感兴趣的DNA序列,并且
转化相应第一和第二细胞核DNA之间的目标DNA序列,使得目标DNA序列被感兴趣的DNA序列所取代。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列把分别与相应第一和第二细胞核DNA序列相似的所述第一和第二DNA序列隔开大约4.5kb。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA序列相似的所述第一或第二DNA序列包含大约1000碱基对(bps)。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA相似的所述第一或第二DNA序列包含少于大约1000碱基对。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA序列相似的所述第一或第二DNA序列包含多于大约1000碱基对。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA序列相似的所述第一或第二序列DNA包含多于大约10,000碱基对。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还包含调控序列或启动子序列。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述启动子是单向的或双向的。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还包含抗生素抗性标记。
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还包含启动子序列和抗生素抗性标记。
11.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还代谢物生物合成或营养同化基因。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述基因编码硝酸盐还原酶或者亚硝酸盐还原酶。
13.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列大约0bps,使得目标DNA的缺失或者近乎缺失。
14.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列编码多肽。
15.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列被转录,但是不编码多肽。
16.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列编码肽,所编码的肽添加到由第一或者第二细胞核DNA序列编码的肽。
17.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列编码非编码调控DNA序列。
18.如权利要求1所述的方法,其特征在于,目标DNA序列与感兴趣DNA序列不相似。
19.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述海藻细胞是微拟球藻细胞。
20.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述海藻细胞是单倍体。
21.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:改变所述海藻细胞的表型特征或者赋予所述海藻细胞新特征。
22.如权利要求1所述的方法,其特征在于,与相应第一细胞核DNA序列相似的第一DNA序列具有第一个碱基对长度,与相应第二细胞核DNA序列相似的第二DNA序列具有第二个碱基对长度,两者不相等。
23.如权利要求1所述的方法,其特征在于,目标DNA序列少于1kb。
24.如权利要求1所述的方法,其特征在于,目标DNA序列被感兴趣DNA序列取代至少是部分取代,使得目标DNA序列的基因功能部分降低。
25.一种转化结构,该结构具有与相应第一海藻细胞细胞核DNA序列相似的第一DNA序列,与相应第二海藻细胞细胞核DNA序列相似的第二DNA序列,和在该转化结构中第一和第二DNA序列之间插入的感兴趣的DNA序列。
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