[发明专利]海藻细胞核基因组的同源组合无效

专利信息
申请号: 201080058106.7 申请日: 2010-10-19
公开(公告)号: CN102858980A 公开(公告)日: 2013-01-02
发明(设计)人: O·基利安;B·维克 申请(专利权)人: 奥罗拉藻类股份有限公司
主分类号: C12N15/74 分类号: C12N15/74;C12P19/34
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 余颖
地址: 美国加利*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 海藻 细胞核 基因组 同源 组合
【权利要求书】:

1.一种把脱氧核糖核酸(DNA)引入海藻细胞细胞核的转化方法,该方法包括:

制备转化结构,该结构具有与相应第一细胞核DNA序列相似的第一DNA序列,与相应第二细胞核DNA序列相似的第二DNA序列,和在该转化结构中第一和第二DNA序列之间插入的感兴趣的DNA序列,并且

转化相应第一和第二细胞核DNA之间的目标DNA序列,使得目标DNA序列被感兴趣的DNA序列所取代。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列把分别与相应第一和第二细胞核DNA序列相似的所述第一和第二DNA序列隔开大约4.5kb。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA序列相似的所述第一或第二DNA序列包含大约1000碱基对(bps)。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA相似的所述第一或第二DNA序列包含少于大约1000碱基对。

5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA序列相似的所述第一或第二DNA序列包含多于大约1000碱基对。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,分别与相应第一或第二细胞核DNA序列相似的所述第一或第二序列DNA包含多于大约10,000碱基对。

7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还包含调控序列或启动子序列。

8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述启动子是单向的或双向的。

9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还包含抗生素抗性标记。

10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还包含启动子序列和抗生素抗性标记。

11.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列还代谢物生物合成或营养同化基因。

12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述基因编码硝酸盐还原酶或者亚硝酸盐还原酶。

13.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列大约0bps,使得目标DNA的缺失或者近乎缺失。

14.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列编码多肽。

15.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列被转录,但是不编码多肽。

16.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列编码肽,所编码的肽添加到由第一或者第二细胞核DNA序列编码的肽。

17.如权利要求1所述的方法,其特征在于,感兴趣DNA序列编码非编码调控DNA序列。

18.如权利要求1所述的方法,其特征在于,目标DNA序列与感兴趣DNA序列不相似。

19.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述海藻细胞是微拟球藻细胞。

20.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述海藻细胞是单倍体。

21.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:改变所述海藻细胞的表型特征或者赋予所述海藻细胞新特征。

22.如权利要求1所述的方法,其特征在于,与相应第一细胞核DNA序列相似的第一DNA序列具有第一个碱基对长度,与相应第二细胞核DNA序列相似的第二DNA序列具有第二个碱基对长度,两者不相等。

23.如权利要求1所述的方法,其特征在于,目标DNA序列少于1kb。

24.如权利要求1所述的方法,其特征在于,目标DNA序列被感兴趣DNA序列取代至少是部分取代,使得目标DNA序列的基因功能部分降低。

25.一种转化结构,该结构具有与相应第一海藻细胞细胞核DNA序列相似的第一DNA序列,与相应第二海藻细胞细胞核DNA序列相似的第二DNA序列,和在该转化结构中第一和第二DNA序列之间插入的感兴趣的DNA序列。

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